[发明专利]一种脂肪组织的保存液及其制备方法与脂肪组织的保存方法

说明书

本发明属于细胞培养技术领域，公开了一种脂肪组织的保存液及其制备方法与脂肪组织的保存方法。本发明所述脂肪组织的保存液为含有海藻糖和枸橼酸钠的磷酸缓冲液，配方简单，不仅能够保持脂肪组织的活性，同时防止脂肪组织中多余的血液成分凝集，防止脂肪颗粒结团，达到延长脂肪组织保存时间的目的。本发明所述脂肪组织冻存液的制备方法为配制磷酸缓冲液，向所述磷酸缓冲液中加入海藻糖和枸橼酸钠，混合均匀，操作简便，易于生产。本发明所述脂肪组织的保存方法为将脂肪组织与本发明所述的保存液混合，2‑8℃保存，对细胞表面标志物无影响，可以有效延长脂肪组织保存时间。

技术领域

本发明属于细胞培养技术领域，具体涉及一种脂肪组织的保存液及其制备方法与脂肪组织的保存方法。

背景技术

脂肪组织主要由大量群集的脂肪细胞构成，聚集成团的脂肪细胞由薄层疏松结缔组织分隔成小叶。脂肪组织中的网状纤维很发达。脂防组织的细胞间质很少。脂肪组织是体内最大的“能源库”，具有贮存脂肪和参与脂肪代谢的功能。脂肪组织还参与能量代谢，并具有产生热量、维持体温、缓冲保护和支持填充等作用。同时，通过抽脂从中获得的大量脂肪干细胞不仅在体内体外具有多项分化潜能，同时在诱导条件下可以向脂肪细胞、软骨细胞、肌细胞分化，而且可以分泌多种细胞因子。

脂肪组织是一种理想的填充材料，可用于自体颗粒脂肪移植技术，至今已有一百多年的历史，目前已日趋成熟，几乎可用于全身各个部位的软组织缺损填充。自体颗粒脂肪移植技术移植的是自身的脂肪颗粒，具有来源丰富、取材容易、操作简单、充盈外形好等优点；同时作为自身的组织，其生物学特性远远优于任何假体材料，无毒无害，不会产生免疫反应和排斥反应，因此受到越来越多的医生和患者的青睐。而自体脂肪移植手术最大的缺陷就是脂肪组织的坏死吸收，成活率不高。尽管为了提高成活率和减少吸收率，国内外的研究人员进行了大量的研究，但目前移植后脂肪组织最终只能保持在移植时的50％左右。因此，提高脂肪移植成功率是关键。而脂肪组织移植成功率与脂肪组织新鲜度、脂肪组织的生物学活性密切相关。

目前通常在医院通过抽脂手术获得脂肪，而脂肪的处理需要在严格的GMP环境中进行，对于不能立即处理的脂肪组织，为了保证分离的脂肪组织新鲜度，需要利用脂肪组织的专用保存液保存，以保证脂肪组织在运输途中保持其生物学活性，提高脂肪组织移植成功率。因此能够保证分离的脂肪组织新鲜及脂肪组织的生物学活性的脂肪组织的保存液对自体脂肪移植手术起着至关重要的作用。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于针对现有技术的问题，提供一种脂肪组织的保存液，以保证分离的脂肪组织新鲜及脂肪组织的生物学活性，提高脂肪组织移植成功率。

为实现本发明的目的，本发明采用如下技术方案。

一种脂肪组织的保存液，为含有海藻糖和枸橼酸钠的磷酸缓冲液。

海藻糖又名茧蜜糖、蘑菇糖，是动物、植物、微生物中广泛分布的一种低聚糖，由于其具有抗逆、抗寒、抗旱、耐高温、吸水、保湿及保护细胞内的生物大分子等特点，使得它在食品、保健品、医药、化妆品、农业等方面有很大的应用前景。枸橼酸钠中的枸橼酸根与血中钙离子形成难解离的络合物，钙离子是凝血过程中所需的物质之一，血液中钙离子减少，而使血液凝固受阻。本发明所述保存液为含有海藻糖和枸橼酸钠的缓冲液，不仅能够保持脂肪组织的活性，同时防止脂肪组织中多余的血液成分凝集，防止脂肪颗粒结团，达到延长脂肪组织保存时间的目的。

作为优选，所述的保存液中所述枸橼酸钠的浓度为30μg/mL-50μg/mL。在一些实施方案中，所述枸橼酸钠的浓度为40μg/mL。

作为优选，所述的保存液中所述海藻糖的浓度为0.5g/ml-1.5g/ml。在一些实施方案中，所述海藻糖的浓度为1g/ml。