[发明专利]一种人工选育正常茭白的方法

说明书

一种人工选育正常茭白的方法，属于茭白育种技术领域。其包括以下步骤：将菰黑粉菌单倍体菌株UET1△Itd1和菰黑粉菌单倍体菌株菌液等体积混合用于接菌；选择3‑5叶期的野茭幼苗作为接种对象；混合菌液用注射器注射苗基部，直至菌液从叶鞘上方溢出为止；将处理后的接种苗进行修剪；过渡培养，两周后完成接种，即可移栽室外露天栽培；移栽室外露天栽培。本发明利用菰黑粉菌筛选得到的菰黑粉菌单倍体菌株UET1△Itd1和菰黑粉菌单倍体菌株UET2△Itd1一对组合的菰黑粉菌接种于野茭中，使其成功孕出正常茭白。该方法操作简单、有效，为茭白育种提供了一个新的方向。

技术领域

本发明属于茭白育种技术领域，具体涉及一种人工选育正常茭白的方法。

背景技术

菰黑粉菌属于担子菌亚门黑粉菌属，是一种典型的二型态真菌，与玉米瘤黑粉菌近源。目前为止，茭白是其所知的唯一寄主，而茭白孕茭是茭白植株与该专一性地寄生在体内的菰黑粉菌共同作用的结果。至今，茭白的种植及保种育种还是采用茭墩分离筛选的方式，人力物力投入较大。因此采用人工接种方式是茭白育种的发展方向。而目前已有的人工育种技术只能使野茭孕出灰茭。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明的目的在于设计提供一种人工选育正常茭白的方法的技术方案。

所述的一种人工选育正常茭白的方法，其特征在于包括以下步骤：

1）将菰黑粉菌（Ustilago esculenta）单倍体菌株UET1△Itd1和菰黑粉菌（Ustilago esculenta）单倍体菌株UET2△Itd1分别在YEPS液体培养基中25-30℃条件下摇菌至OD₆₀₀为2.0，再以1:100的比例稀释至YEPS液体培养基中25-30℃条件下摇菌至OD₆₀₀为0.8-1.0，离心收集菌体，用纯水稀释成终浓度为OD₆₀₀为2.0的菌液，将菰黑粉菌单倍体菌株UET1△Itd1和菰黑粉菌单倍体菌株菌液等体积混合用于接菌，所述的菰黑粉菌（Ustilago esculenta）单倍体菌株UET1△Itd1保藏号为CGMCC No.16723，所述的菰黑粉菌（Ustilago esculenta）单倍体菌株UET2△Itd1保藏号为CGMCC No.16724；

2）选择野茭管状根进行育苗，温室培育20-30天，并移栽至小盆，营养土轻微覆盖根部，并于相同条件的温室继续培育7-10天，选择3-5叶期的野茭幼苗作为接种对象；

3）对步骤1）得到的混合菌液用注射器注射苗基部，直至菌液从叶鞘上方溢出为止；

4）将处理后的接种苗进行修剪，放置过多的蒸腾作用导致植物萎焉；

5）将接种后的幼苗继续放在22-25℃温室过渡培养，两周后完成接种，即可移栽室外露天栽培；

6）移栽室外露天栽培的时间应控制在3-4月以及9-10月份，防止室外温度过高或过低不利于菌的生长，施肥参考正常茭白种植标准。

所述的一种人工选育正常茭白的方法，其特征在于所述的步骤1）中YEPS液体培养基含有以下重量百分比的组分：蛋白胨2%、蔗糖2%、酵母粉1%和水余量。

所述的一种人工选育正常茭白的方法，其特征在于所述的步骤2）中温室培育条件温度控制在22-25℃，光照时间为8-12小时。

所述的一种人工选育正常茭白的方法，其特征在于所述的步骤2）中小盆大小为10×10cm。

所述的一种人工选育正常茭白的方法，其特征在于所述的步骤3）中注射苗基部幼苗生长点以上位置。