[发明专利]一种基于3D打印的细胞均一性分布的生物墨水及其装配方法

权利要求书

1.一种基于3D打印的细胞均一性分布的生物墨水，包括生物墨水本体和悬浮于所述生物墨水本体中的生物活性细胞，其特征在于，所述生物墨水本体包括如下质量百分比的组分：

甲基丙烯酸酐化明胶 3%-10%；

蚕丝蛋白微球 0.5%-4.5%；

胎牛血清 0.3%-1%；

光交联引发剂 0.05%-0.5%；

平衡缓冲溶液 85%-95%；

所述生物活性细胞的数量为1╳10⁶~2╳10⁶个。

2.如权利要求1所述的生物墨水，其特征在于，所述蚕丝蛋白微球的粒径为0.1mm~0.4mm。

3.如权利要求1所述的生物墨水，其特征在于，所述平衡缓冲溶液的pH为7.2~7.4。

4.如权利要求3所述的生物墨水，其特征在于，所述平衡缓冲溶液为HEPES平衡缓冲液。

5.如权利要求1所述的生物墨水，其特征在于，所述光交联引发剂为光引发剂2959。

6.如权利要求1所述的生物墨水，其特征在于，所述生物活性细胞为3T3细胞系或者HUSMC细胞系。

7.如权利要求1所述的生物墨水，其特征在于，所述生物墨水固化成型后为水凝胶状态，具有微观纳米纤维网络结构。

8.一种如权利要求1~7任一项所述的生物墨水的装配方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）配置若干组生物墨水本体备用，若干所述生物墨水本体含有不同质量分数的蚕丝蛋白微球且蚕丝蛋白微球的质量分数依次递增；

（2）将生长状态良好的生物活性细胞等分为若干份，分别加入配置好的若干生物墨水本体中混匀，得到若干组生物墨水；

（3）取一定体积的、步骤（2）中含蚕丝蛋白微球质量分数最低的生物墨水置于料筒底部；

（4）将料筒底部置于冰水浴中，使生物墨水冷却15秒~30秒；

（5）取出料筒，在其余组生物墨水中，取一定体积的含蚕丝蛋白微球质量分数最低的生物墨水置于已凝固的生物墨水上；

（6）循环重复步骤（4）、（5）直至若干组生物墨水装料完毕；

（7）将装有若干生物墨水的料筒置于细胞培养箱中，使生物墨水复温均匀，取出后室温下打印；

（8）打印后采用波长为360nm-390nm的紫外光进行固化。

9.一种如权利要求8所述的生物墨水的制备方法，其特征在于，采用如下方法制备生物墨水本体：将所述甲基丙烯酸酐化明胶按一定比例溶解于所述平衡缓冲溶液，加入一定量的光交联引发剂并在40℃~80℃下搅拌均匀，对所得溶液进行消毒，随后降温至20℃~40℃，加入一定量的蚕丝蛋白微球及胎牛血清，在超声作用下混合得到弱交联溶液。