[发明专利]一种用于预防龋齿的卵黄抗体及其制备方法和卵黄抗体制剂

说明书

本发明公开了一种用于预防龋齿的卵黄抗体及其制备方法和卵黄抗体制剂，所述制备方法为，采用变异链球菌免疫原免疫母鸡后，收集免疫后的所述母鸡的鸡蛋并提取卵黄抗体；所述变异链球菌免疫原包括变异链球菌的破碎蛋白溶出物。本发明提供的制备方法通过采用变异链球菌的破碎蛋白溶出物免疫母鸡，最终制得的卵黄抗体特异性强，卵黄抗体效价高，能够用于制备抗龋齿制剂，特别是牙膏和漱口水能够有效抑制细菌生物膜的形成，抑制细菌生长，表现出优异的抗龋齿效果，而且，这种抗体对动物损害小，安全可靠；无毒副作用，不会产生耐药性，无有毒物质残留；易于控制规模化生产，生产成本低。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，更具体地，涉及一种用于预防龋齿的卵黄抗体及其制备方法和卵黄抗体制剂。

背景技术

龋齿，世界卫生组织认定的三大重点防治疾病之一，发病率高，分布范围广，患者常因青少年时龋齿引发的牙痛而不能充分咀嚼食物，妨碍正常的消化与吸收，从而导致生长发育方面的疾病或其他疾病。目前龋齿只能靠牙科填充手段进行治疗，不能自愈。罹患龋齿后，牙痛会影响食欲，干扰患者正常的咀嚼，进而影响食物的消化和吸收，出现缺乏营养的状况。龋齿的进一步发展，会引起颜面蜂窝织炎、牙髓炎、齿槽逸脓、根周脓肿等口腔疾病，危害青少年的颌面发育。

目前有研究表明，龋病主要是由变异链球菌(Streptococcus mutans，sm)引起的具有传染性的疾病，是人类最常见的疾病之。变异链球菌通过黏附在牙齿表面，形成口腔生物膜，即牙菌斑。同时，变异链球菌代谢产生以乳酸为主的酸性副产物导致局部pH值下降引起牙釉质层脱矿，最终形成龋洞，影响人类健康。

卵黄免疫球蛋白，又称为卵黄抗体。是从血液中的抗体，富集到鸡蛋蛋黄中的一种活性抗体，在抗菌和抗病毒方面具有优良的特性。引起来国内外学者的广泛研究。有研究表明，特异性卵黄抗体能够为人或者动物提供有效的被动免疫。应用细菌疫苗免疫产蛋鸡可获得抗变异链球菌的特异性IgY抗体，口服特异性IgY可阻止变异链球菌黏附于牙齿表面，干扰牙菌斑的形成，发挥抑龋作用，并且这一种抗体，具有安全性强，无毒副作用和生产成本低等优点。

但是，现有的卵黄抗体对变异链球菌的特异性仍不够强，需要开发出特异性强的卵黄抗体。另外，还需要开发出能够预防龋齿的制剂。

发明内容

本发明为克服上述现有技术所述的缺陷，提供一种用于预防龋齿的卵黄抗体的制备方法，所述方法制得的卵黄抗体对变异链球菌的特异性强，卵黄抗体效价高，可用于预防龋齿，无毒副作用，安全可靠，且易于规模化生产，生产成本低。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：

一种用于预防龋齿的卵黄抗体的制备方法，所述制备方法采用变异链球菌免疫原免疫母鸡后，收集免疫后的所述母鸡的鸡蛋并提取卵黄抗体；

所述变异链球菌免疫原包括变异链球菌的破碎蛋白溶出物。

本发明中用于免疫母鸡的变异链球菌免疫原不同于普通的甲醛灭活的变异链球菌，而是采用超声破碎的变异链球菌，还可以复合甲醛灭活的变异链球菌，从而得到本发明中使用的变异链球菌免疫原。采用含有破碎蛋白溶出物的变异链球菌免疫原免疫母鸡，最终提取的卵黄抗体特异性更强，卵黄抗体效价高，能够用于制备抗龋齿制剂，特别是牙膏和漱口水，表现出优异的抗龋齿效果，能够抑制变异链球菌口腔生物被膜的形成。而且，无毒副作用，安全可靠，且易于规模化生产，生产成本低。

发明人研究了该卵黄抗体的特异性，测试了该卵黄抗体对其他细菌的交叉反应率。研究结果显示，牙龈卟啉单胞菌、伴放线杆菌、Solobacterium moorei细菌、幽门螺杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、屎肠球菌、鼠伤寒沙门杆菌、枯草芽孢杆菌、白色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、铜绿假单胞菌、单核球增多性李斯特菌、副溶血性弧菌、嗜水气单胞菌、珊瑚色诺卡氏菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、荧光假单胞菌交叉反应率低，交叉反应率在0.39%~0.78%之间。