[发明专利]保护性HPV卵黄抗体及其在HPV的预防和治疗的应用

说明书

本发明属于生物医学领域，具体涉及一种HPV L1重组微环DNA的卵黄抗体及其在制备预防/治疗HPV感染的药物中的应用。其中HPV L1重组微环DNA包含HPV16的L1基因片段以及信号肽序列，将其作为核酸抗原直接免疫产蛋鸡获得本发明的卵黄抗体。DNA核酸抗原肌肉注射免疫产蛋鸡所获得的卵黄抗体(IgY)的生物活性远超一般技术(皮下注射蛋白抗原)制备的卵黄抗体，抗体效价更高，特异性更强。本发明的卵黄抗体可用于制备预防/治疗HPV感染的药物，阴道用药对HPV阳性患者输入高活性抗HPV抗体，结合纳米脂质体的方法，抗体跨膜进入细胞，直接中和细胞内的HPV病毒。本发明的卵黄抗体对于预防宫颈癌有重要意义。

本专利为发明“保护性HPV卵黄抗体及其应用”的分案申请，原案申请号为：CN201810186327.0，申请日期为20180307。

技术领域

本发明属于生物医学领域，具体涉及一种HPV L1重组微环DNA的卵黄抗体及其在预防/治疗HPV感染的应用。

背景技术

宫颈癌占女性妇科恶性肿瘤的第二位，现已成为威胁女性健康的重要疾患，中国每年死于宫颈癌的人数将近5万，宫颈癌的病因研究一直为国内外学者所重视，研究发现引起宫颈癌的关键是HPV的感染。HPV属于乳头瘤病毒科乳头瘤病毒属，是球形、双链环状DNA病毒。HPV主要通过直接或间接接触污染物品或通过性传播感染人类。HPV的感染有宿主特异性和组织特异性，只能感染人类的皮肤和粘膜受损的基底细胞。

HPV经损伤的宫颈粘膜首先感染基底细胞层，病毒以少量游离DNA状态潜伏在基底细胞内，以实现免疫逃逸。当基底细胞不断分化、成熟、向粘膜表层迁移，HPV病毒就大量增殖。随着粘膜表层上皮细胞的凋亡，病毒颗粒大量释放到上皮表面，作为新的感染源可进一步加重感染。长期HPV持续感染导致宿主细胞相关基因表达发生变化，可逐渐发展为宫颈癌。

HPV至今已鉴定明确的大约有200多个亚型，根据其致病和预后不同又可分为高危型HPV(HR-HPV)和低危型HPV(LR-HPV)，其中HR-HPV 15种，包括HR-HPV16、18、31、33、35、39、45、5l、52、56、53、58型等，感染后可引起癌前病变和宫颈癌。其中HPV16和HPV18是最主要的流行株。

HPV L1衣壳蛋白是人乳头瘤病毒的主要结构蛋白,是病毒感染细胞和细胞免疫反应攻击病毒的主要靶位，且该蛋白较为保守。因此可以针对L1蛋白开发预防/治疗HPV感染的药物。

卵黄抗体(Immunoglobulin of yolk,IgY)为通过免疫注射产蛋鸡，由其生产的蛋黄中提取相应的抗体，并可用于相应疾病的预防和治疗。DNA核酸抗原肌肉注射免疫产蛋鸡所获得的卵黄抗体(IgY)的生物活性远超一般技术(皮下注射蛋白抗原)制备的卵黄抗体，抗体效价更高，特异性更强。而目前尚无核酸抗原免疫获得的HPV L1卵黄抗体用于预防宫颈癌的先例。

目前临床上对宫颈粘膜细胞内HPV病毒无有效治疗方法。若能够在病人HPV阳性时使其快速转阴，无疑将在很大程度上降低病人由HPV阳性转为宫颈癌的风险。

因此开发一种核酸抗原免疫获得的HPV L1卵黄抗体以及其在预防/治疗HPV感染中的应用，对于宫颈癌易感者的预防以及HPV阳性患者快速转阴具有重大意义。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种重组HPV L1片段，其选择的HPV L1保守性强。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

重组HPV16L1片段，其由以下部分依次连接组成：信号肽序列区、HPV16亚型的L1基因、标签区；所述HPV16亚型的L1基因序列为SEQ ID NO:1所示。