[发明专利]用于血液、口腔拭子进行PCR的裂解液及试剂盒在审
| 申请号： | 201811561417.X | 申请日： | 2018-12-19 |
| 公开（公告）号： | CN109402238A | 公开（公告）日： | 2019-03-01 |
| 发明（设计）人： | 夏昊强;姚啟聪;江伟钊;王芳;周煌凯;刘倩;关丽雅;邓美英;程祖福 | 申请（专利权）人： | 广州海思医疗科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/686 | 分类号： | C12Q1/686 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人： | 颜希文;宋静娜 |
| 地址： | 510000 广东省广州市番禺区小谷*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 裂解液 拭子 口腔 试剂盒 血液 硫酸铵 分子诊断技术 裂解液处理 发明试剂 检测技术 蛋白酶K 优化 | ||
1.用于血液、口腔拭子的裂解液，其特征在于，包含以下浓度的组分：Tris-Hcl 60～70mM、硫酸铵16～17mM、Mgcl2·6H2O 6～7mM、EDTA 6～7μM、SDS 1.5～2.5μM和蛋白酶K 30～55μg/ml，所述Tris-Hcl的pH值为8.2～9；裂解液处理后的血液、口腔拭子可直接进行PCR，所述PCR包括荧光定量PCR。
2.如权利要求1所述的裂解液，其特征在于，包含以下浓度的组分：Tris-Hcl 67mM、硫酸铵16.6mM、Mgcl2·6H2O 6.7mM、EDTA 6.7μM、SDS 1.7μM和蛋白酶K 50μg/ml，所述Tris-Hcl的pH值为8.8。
3.如权利要求1或2所述的裂解液在PCR中的应用。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述PCR为荧光定量PCR，裂解液在处理血液或口腔拭子时，裂解液与血液或口腔拭子样本的体积比为19:1；裂解液与样本混匀后，先95℃加热3min，再65℃加热10min，12000rpm离心1min，上清液即为待检测液。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，荧光定量PCR的反应体系为18μl，待检测液为2μl。
6.如权利要求4所述的应用，其特征在于，荧光定量PCR的反应程序为：95℃10min；95℃15s，65℃1min，40个循环；65℃检测荧光信号。
7.一种用于血液、口腔拭子进行PCR的试剂盒，其特征在于，包含如权利要求1或2所述的裂解液，所述PCR包括荧光定量PCR。
8.如权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，还包括进行荧光定量PCR的反应液。
9.如权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，进行荧光定量PCR的所述反应液包含DNA聚合酶、引物、dNTPs、荧光染料和无核酸酶水。
10.如权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，进行荧光定量PCR的所述反应液包含DNA聚合酶、引物、dNTPs、Taqman探针和无核酸酶水。
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