[发明专利]间充质干细胞外泌体在制备预防和治疗放射性肺损伤的药物中的应用

说明书

本发明公开了间充质干细胞外泌体在制备预防和治疗放射性肺损伤的药物中的应用，采用间充质干细胞外泌体尾静脉注射给药治疗经放射后的肺损伤小鼠，有效降低炎症因子水平(IL‑1β、IL‑6、TNF‑α、TGF‑β)，有效提高小鼠存活率，降低因放射性肺损伤导致的肺炎和肺纤维化病变，间充质干细胞外泌体具有安全性高、化学性质稳定、易于存储，为安全有效治疗放射性肺损伤提供的一种新途径。

技术领域

本发明涉及干细胞应用技术领域，特别涉及一种间充质干细胞外泌体在制备预防和治疗放射性肺损伤的药物中的应用。

背景技术

放射性治疗(Radiotherapy，放疗)，是一种在恶性肿瘤治疗过程中广泛应用的治疗方式，对胸部恶性肿瘤如肺癌、乳腺癌、食管癌、纵隔恶性肿瘤效果显著。放射性治疗时通常发生放射性肺损伤(radiation-induced lung injury,RILI)。RILI是放疗过程中严重的并发症，主要表现为放射性肺炎、肺充血、肺泡纤维蛋白渗出增多或透明膜形成，最后形成肺间质纤维化。

目前，临床上缺乏对放射性肺损伤有效治疗方法，常见治疗方式为吸氧、止咳、平喘等，对于严重RILI病人只能调整或停止放疗；因此，放射性肺损伤危害成为制约放射性治疗应用的瓶颈，间充质干细胞治疗对放射性肺损伤在小鼠水平取得了一定的治疗效果，但由于间充质干细胞存在诸多弊端，如自体间充质干细胞取材、培养周期长，异体间充质干细胞存在一定的免疫风险和伦理问题，制约了其临床应用；由于间充质干细胞外泌体不含有遗传物质，规避了一系列问题，成为治疗放射性肺损伤的潜在治疗手段。

发明内容

针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本发明的目的是提供间充质干细胞外泌体在制备预防和治疗放射性肺损伤的药物中的应用，可克服因放射性肺损伤危害成为制约放射性治疗应用的瓶颈，有效降低炎症因子水平，降低因放射性肺损伤导致的肺炎和肺纤维化病变，提高小鼠存活率，间充质干细胞外泌体具有安全性高、化学性质稳定、易于存储，为安全有效治疗放射性肺损伤提供的一种新途径。

为实现上述目的，本申请提供一种间充质干细胞外泌体在制备预防和治疗放射性肺损伤的药物中的应用。

进一步地，在放射性肺损伤前/后静脉输入所述间充质干细胞外泌体的进行给药，降低血液中炎症因子水平，延缓肺炎与肺纤维化程度。

进一步地，所述炎症因子包括IL-1β、IL-6、TNF-α、TGF-β。

进一步地，所述间充质干细胞外泌体来源于间充质干细胞，所述间充质干细胞来源于骨髓。

进一步地，所述间充质干细胞是通过以下方法制备得到的：取小鼠大腿骨置于含有千分之二的双抗的PBS溶液中，之后，在超净台中剪开骨头的两端，用培养基将骨髓冲出来，置于培养皿中；37℃细胞培养箱中培养2小时，2小时之后将所述培养基去除，更换新鲜的所述培养基，置于37℃培养；之后，每隔2天换一次所述培养基，当细胞数量达到80％以上，进行传代。

进一步地，所述培养基为含有10％血清的高糖DMEM培养基。

进一步地，所述间充质干细胞外泌体，是通过以下方法制备得到的：选用间充质干细胞进行培养，待细胞密度达到90％时，弃掉原培养基，换α-MEM无血清培养基培养12h后放入低氧培养箱培养，48h后收集上清液；将所述上清液于4℃，3000rpm离心10min，然后去除细胞碎片，将去除细胞碎片后的上清液于4℃，10⁴g离心1h，弃去上清，加入PBS溶液重悬；再超速离心1h，弃去上清，加入100μl PBS溶液重悬，-80℃保存备用。

进一步地，所述低氧培养箱的条件设定为37℃、94％N₂、1％O₂、5％CO₂。

进一步地，提取所述间充质干细胞外泌体采用密度梯度离心法。