[发明专利]墨旱莲药材UPLC特征图谱的构建方法和检测方法

说明书

本发明涉及一种墨旱莲药材UPLC特征图谱构建方法和检测方法。该特征图谱构建方法包括以下步骤：分别以蟛蜞菊内酯和4,5‑二‑O‑咖啡酰奎宁酸为对照品制备对照品参照物溶液；以墨旱莲对照药材制备对照药材参照物溶液；分别取墨旱莲药材和标准汤剂样品，加提取溶剂提取，过滤，所得滤液作为供试品溶液和标准汤剂供试品溶液；分别吸取所述参照物溶液、供试品溶液、标准汤剂供试品溶液，注入超高效液相色谱仪，测定；比较所得供试品图谱与标准汤剂供试品图谱，标定8个水溶性成分的特征峰，获得墨旱莲药材的UPLC特征图谱。该特征图谱能用于定性、定量分析墨旱莲药材的质量，能够确保采用该药材制备的墨旱莲传统汤剂的质量，也适用于检测含墨旱莲的其它制剂。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，特别是涉及一种墨旱莲药材UPLC特征图谱的构建方法和检测方法。

背景技术

墨旱莲别称旱莲草、金陵草、乌心草、白花蟛蜞菊等。以原名鳢肠，始载于《唐本草》，为菊科植物鳢肠Eclipta prostrata L.的干燥地上部分，是常用中药之一，具有滋补肝肾，凉血止血的功效。用于肝肾阴虚，牙齿松动，须发早白，眩晕耳鸣，腰膝酸软，阴虚血热吐血、衄血、尿血，血痢，崩漏下血，外伤出血。近代药理学研究表明墨旱莲有免疫调节、抗衰老、保肝、抗肿瘤等活性作用。墨旱莲所含的化学成分有三萜皂苷类、噻吩类、香豆草醚类、黄酮类等。其具有较强的临床应用价值，市场需求广阔，被开发成中药配方颗粒及相关复方制剂广泛用于临床。

中药的临床使用多以传统汤剂为主。中药汤剂的物质基础，是中医理论指导下防治疾病的基础。现行的法定标准仅针对单一成分进行定量控制，量效关系不能全面反映中药成分的整体作用。在现阶段，中药绝大多数有效成分未明确的情况下，中药指纹图谱/特征图谱的建立能大大提高中药质量控制的技术水平及科技含量。

《中国药典》2015年版将蟛蜞菊内酯作为墨旱莲质量评价指标，仅对蟛蜞菊内酯含量进行控制，并不能全面反映其质量。且目前文献研究报道的关于墨旱莲特征图谱的建立，均只针对药材原料，指标成分多以脂溶性成分为研究对象，主要用于中药材真伪、产地、品质差异的定性鉴别，较难全面反映墨旱莲的质量特征，也不能反应传统中药汤剂的物质基础特征。

发明内容

基于此，本发明提供一种墨旱莲药材UPLC特征图谱的构建方法和检测方法。构建的墨旱莲药材的特征图谱具有8个水溶性成分的特征峰，可以快速、全面实现对墨旱莲药材多个特征成分的质量监控，并能反应墨旱莲的传统中药汤剂的物质基础特征。

具体技术方案为：

一种墨旱莲药材UPLC特征图谱的构建方法，包括以下步骤：

参照物溶液的制备：分别以蟛蜞菊内酯和4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸为对照品，加溶剂溶解，制备对照品参照物溶液；向墨旱莲对照药材中加入提取溶剂，加热回流，得提取液，将所述提取液滤过，取续滤液作为对照药材参照物溶液；

供试品溶液的制备：向墨旱莲药材中加入提取溶剂，加热回流，得提取液I，将所述提取液I滤过，取续滤液作为供试品溶液I；向墨旱莲标准汤剂样品中加入提取溶剂，加热回流，得提取液II，将所述提取液II滤过，取续滤液作为供试品溶液II；

测定：将所述对照品参照物溶液、对照药材参照物溶液、供试品溶液I和供试品溶液II注入超高效液相色谱仪中测定，标定水溶性共有峰，即得墨旱莲药材UPLC特征图谱。

在其中一个实施例中，所述超高效液相色谱的色谱条件包括：

固定相：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；

流动相：流动相A为乙腈，流动相B为三乙胺磷酸缓冲液，所述三乙胺磷酸缓冲液以水为溶剂，包含体积分数为0.5％-0.6％的磷酸和体积分数为0.7％-0.83％的三乙胺，梯度洗脱；

所述梯度洗脱具体为：