[发明专利]一种成熟玉米根系临时切片的制备方法

说明书

一种成熟玉米根系临时切片的制备方法，属于植物根系切片制备技术领域。本发明针对现有临时切片制备过程中图像不清晰，以产生观察误差的问题，提供了一种成熟玉米根系临时切片的制备方法，将染色后的切片进行抽真空处理，排除切片中99％的气泡，使观察图像更加清晰，减少了观察误差，为成熟玉米根系解剖结构的研究提供了便利。

技术领域

本发明属于植物根系切片制备技术领域，具体涉及一种成熟玉米根系临时切片的制备方法。

背景技术

临时切片用于观察植物内部结构，但在实际实验中发现，临时切片传统方法用于较为幼嫩的植物组织，有较好的效果，但是当植物进入成熟期，特别是玉米根系，细胞壁加厚，在切片后，观察时，会出现大量气泡，影响观察结果。

发明内容

针对现有临时切片制备过程中图像不清晰，以产生观察误差的问题，本发明提供了一种成熟玉米根系临时切片的制备方法，包括如下步骤：

1)将成熟期的玉米根横切面削平，切成段块，在FAA固定液或卡诺氏液中固定，固定时间为20-72h；

2)然后，取出材料切下薄片，将薄片置于水中；

3)挑选薄而透明的切片，经染色后，置于载玻片上；

4)然后，向切片上滴加双蒸水，经真空处理后，盖上盖玻片，使切片与载玻片切合后，制备获得成熟玉米根系临时切片。

进一步地限定，步骤1)所述段块的厚度为1-2cm。

进一步地限定，步骤1)所述固定时间为24h。

进一步地限定，步骤3)所述染色是指将切片经质量分数1％的番红水溶液染色20-40s，优选为30s。

进一步地限定，步骤4)所述向切片上滴加双蒸水，滴加的量为120-150μL。

进一步地限定，步骤4)所述真空处理是指将切片在真空度为5-10torr条件下，抽真空5-10min。

更进一步地限定，步骤4)所述真空处理是指将切片在真空度为8torr条件下，抽真空7min。

有益效果

本发明运用真空泵，将染色后的切片进行抽真空处理，能排除切片中99％的气泡，使观察图像更加清晰，减少了观察误差，节省大量的时间，为成熟玉米根系解剖结构的研究提供了便利。

附图说明

图1成熟玉米根系切片经染色后，经40倍光学显微镜观察的图像。

图2成熟玉米根系切片经染色、抽真空后，经40倍光学显微镜观察的图像。

图3成熟玉米根系切片经染色后，经100倍光学显微镜观察的图像。

图4成熟玉米根系切片经染色、抽真空后，经100倍光学显微镜观察的图像。

具体实施方式

下述实施例中，所述的成熟玉米根系样品为取自玉米乳熟期的根系。

所用的FAA固定液又叫标准固定液，由福尔马林5mL，冰醋酸5mL，体积分数70％乙醇90mL，丙三醇5mL混合后配制而成。

卡诺氏液:由无水乙醇和冰乙酸按照3:1体积比混合制备获得。

其他试剂或仪器等如无特殊说明，均可通过商业化途径购买获得。

实施例1.成熟玉米根系临时切片的制备方法。

1)将取回的乳熟期玉米根系材料用蒸馏水反复冲洗干净，将材料横切面削平，切成1-2cm的段块，在FAA固定液(标准固定液)中固定24h。