[发明专利]一种在分子水平调控水牛乳腺细胞甘油酸三酯含量的方法有效
| 申请号： | 201811571294.8 | 申请日： | 2018-12-21 |
| 公开（公告）号： | CN109536519B | 公开（公告）日： | 2021-11-02 |
| 发明（设计）人： | 马小娅;梁贤威;邓廷贤;庞春英;段安琴;陆杏蓉;梁莎莎 | 申请（专利权）人： | 广西壮族自治区水牛研究所 |
| 主分类号： | C12N15/53 | 分类号： | C12N15/53;C12N15/85;C12N15/113;C12N5/10;C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 北京天奇智新知识产权代理有限公司 11340 | 代理人： | 牙斐颖 |
| 地址： | 530001 广西壮*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 分子 水平 调控 水牛 乳腺 细胞 甘油 酸三酯 含量 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种在分子水平提高水牛乳腺细胞甘油酸三酯含量的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：
（1）利用干扰片段转染水牛乳腺原代细胞，在37 ℃条件下，含5%CO2的培养箱中反应48h；
（2）FADS2基因的表达检测：提取步骤（1）转染后的水牛原代细胞总RNA；反转录总RNA；然后通过荧光定量PCR法测定；
（3）甘油酸三酯含量检测：收集步骤（1）的水牛原代细胞培养基在室温2000 g离心5min，取上清测定甘油三酯浓度；
所述FADS2基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：1所示；
所述干扰片段序列如序列表中SEQ ID NO：3所示。
2.根据权利要求1所述一种在分子水平提高水牛乳腺细胞甘油酸三酯含量的方法，其特征在于，所述荧光定量PCR法的内参基因为GAPDH基因。
3.根据权利要求1所述一种在分子水平提高水牛乳腺细胞甘油酸三酯含量的方法，其特征在于，所述荧光定量PCR法的FADS2的荧光定量检测引物为：
上游引物序列：5’-ggaagaccgctgaggacatgaac-3’；
下游引物序列：5’-gcctgagaggtagcaaggacgaa-3’。
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