[发明专利]一种提高水稻种子胚乳中β-胡萝卜素含量的方法

权利要求书

1.一种提高水稻种子胚乳中β-胡萝卜素含量的方法，包括以下步骤：

1)将根据水稻的密码子偏好性对酿酒酵母截短的HMG1、玉米的PSY基因和欧文氏菌的CrtI基因的序列进行优化，获得tHMG1、PSY1和CrtI1三个基因序列，所述tHMG1基因的具体核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述PSY1基因的具体核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述CrtI1基因的具体核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；

2)将tHMG1、PSY1和CrtI1三个基因分别与水稻胚乳特异储存蛋白GluB-1基因启动子和终止子融合，分别构建基因表达盒；

3)将步骤2)获得的3个基因表达盒元件分别连接入植物表达载体，获得含tHMG1、PSY1和CrtI1三基因表达盒的植物多基因转化载体；

4)将步骤3)中获得的植物多基因转化载体转入农杆菌，转化至水稻愈伤组织，获得胚乳中β-胡萝卜素含量提高的转基因水稻。

2.根据权利要求1所述提高水稻种子胚乳中β-胡萝卜素含量的方法，其特征在于，步骤2)中，所述水稻胚乳特异性储存蛋白GluB-1基因启动子序列如SEQ ID NO.5所示；水稻胚乳特异性储存蛋白GluB-1基因终止子序列如SEQ ID NO.6所示。

3.根据权利要求1所述提高水稻种子胚乳中β-胡萝卜素含量的方法，其特征在于，步骤3)中，所述的植物表达载体为pCAMBIA1301。

4.根据权利要求1所述提高水稻种子胚乳中β-胡萝卜素含量的方法，其特征在于，步骤4)中的水稻愈伤组织为水稻中花11的愈伤组织。

5.tHMG1基因、PSY1基因和CrtI1基因在水稻转基因育种中的应用，其特征在于，所述tHMG1基因、PSY1基因和CrtI1基因分别是根据水稻的密码子偏好性对酿酒酵母截短的HMG1、玉米的PSY基因和欧文氏菌的CrtI基因的序列进行优化后获得，所述tHMG1基因的具体核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述PSY1基因的具体核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述CrtI1基因的具体核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述应用指将所述tHMG1基因、PSY1基因和CrtI1基因分别与水稻胚乳特异储存蛋白GluB-1基因启动子和终止子融合，构建基因表达盒，获得转化载体，转化至水稻中，获得胚乳中β-胡萝卜素含量提高的转基因水稻。