[发明专利]骨髓间充质干细胞在预防放射性肺损伤的应用

权利要求书

1.骨髓间充质干细胞在预防放射性肺损伤的应用，其特征在于，所述的放射性肺损伤包括放射性肺炎和晚期肺纤维化。

2.如权利要求1所述的骨髓间充质干细胞在预防放射性肺损伤的应用，其特征在于，所述的骨髓间充质干细胞分离方法：

(1)处死小鼠，将所述小鼠浸泡于酒精里，处理后得到所述小鼠的股骨，并将所述股骨置于盛有磷酸盐缓冲液的培养皿里；

(2)将步骤(1)所述的培养皿密封后拿进生物安全柜；将无菌筛置于50ml管口处；取一根股骨，剪开两端；吸取1ml H-DMEM从股骨一端将骨髓内容物吹至无菌筛上，使滤液自然流到50ml管中，吹2ml之后换吹股骨另一端，吹至股骨发白；

(3)将步骤(2)所述50ml管中的滤液倒入15ml管中；所述15ml管1100r/min离心5分钟；

(4)弃掉15ml管中上清液，吸取1ml H-DMEM将15ml管内细胞吹打均匀；

(5)重复步骤(2)至(4)的操作，处理另一根股骨；

(6)合并两管中的细胞至原代培养皿中，添加2mlH-DMEM作为培养基，混匀后置培养箱中培养骨髓间充质干细胞。

3.如权利要求2所述的骨髓间充质干细胞在预防放射性肺损伤的应用，其特征在于，所述培养骨髓间充质干细胞的方法包括：

(1)原代培养：

骨髓间充质干细胞在培养箱中培养24小时后更换H-DMEM；培养48小时后，使用加有磷酸盐缓冲液冲洗骨髓间充质干细胞三遍后更换H-DMEM；培养72小时后使用加有磷酸盐缓冲液冲洗骨髓间充质干细胞三遍后更换H-DMEM；继续培养15天得到P0代骨髓间充质干细胞；

(2)传代培养：

将P0代骨髓间充质干细胞转移至传代培养皿中培养，所述传代培养皿中加入H-DMEM作为培养基，每2天更换一次H-DMEM；传代培养至所述传代培养皿中细胞密度大于等于80％再次进行传代，传代至P5代，得到骨髓间充质干细胞。

4.如权利要求3所述的骨髓间充质干细胞在预防放射性肺损伤的应用，其特征在于，传代培养至第三代之后，利用流式技术进行细胞类型的鉴定，选出具有间充质干细胞特征且染色体核型正常的所述骨髓间充质干细胞。

5.骨髓间充质干细胞在制备预防放射性肺损伤药物中的应用。