[发明专利]用于检测组织多肽特异性抗原的试剂盒

说明书

本发明公开了一种用于检测组织多肽特异性抗原的试剂盒，包括示踪标记物标记的酶标抗体和包被有TPS抗体的磁珠；其中的示踪标记物为辣根过氧化物酶（HRP）、碱性磷酸酶（ALP）、鲁米诺及其衍生物、异鲁米诺及其衍生物、吖啶酯或金刚烷中的至少一种，实际制备时，可优选采用辣根过氧化物酶。本发明制备的试剂盒检测组织多肽特异性抗原（TPS）时，不需要对待检样本进行稀释处理，可以直接检测，从而有利于提高低值样本的检测灵敏度；借助化学发光检测仪，加样方式完全由仪器全自动操作，降低了人为因素对实验结果造成的干扰。大幅缩短测试时间，有利于临床上快速的得到诊断结果。

技术领域

本发明涉及生物物质检测技术，尤其是涉及一种用于检测组织多肽特异性抗原（TPS）的试剂盒。

背景技术

组织多肽特异性抗原（TPS）是细胞角蛋白（Cytokeratin CK）18个片段上与M3单克隆抗体结合的抗原表位，称为M3抗原决定簇；TPS活性片段的相对分子质量为13000KD，所含抗原决定簇M3是由322-340个氨基酸组成的。

TPS在一些生长活跃的正常体细胞（如肝细胞、泌尿生殖道细胞）中有少量表达，而在上皮来源的恶性肿瘤和转移癌中则为高表达。在细胞周期的S晚期和G2期，TPS被合成并释放入血或其他体液中。因此，血清中TPS的含量高低成为衡量肿瘤细胞分裂和增生活性的一个特异性指标。与传统的肿瘤标志物如CEA、CA153、CA152等不同的是，TPS是“肿瘤活性依赖型”，它的血清含量的高低与正在分裂、增殖的细胞数目有关，即与肿瘤的活性有关；而CEA、CA153、CA152等则是“肿瘤容量依赖型”的，与肿瘤的瘤体负荷即肿瘤细胞的数目有关。因此，在肿瘤的早期，在出现肉眼复发或转移之前，由于肿瘤细胞数目较少，那些反映肿瘤容量的标志物的血清水平往往是很低的，而此时肿瘤细胞分裂、增殖活跃，因而TPS可以很高，从而有利于肿瘤的早期诊断、治疗、病情监测和预后判断。

目前市场上TPS试剂盒主要以瑞典IDL公司生产的为主，其检测方法为酶联免疫吸附试验法（ELISA）。

酶联免疫吸附试验法是指将抗体或者抗原固定到聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原抗体的特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测。其检测时间长，至少需要6个小时，甚至过夜反应才能完成测试；加样方式主要依靠手工，效率低，容易导致实验结果存在较大误差；此外，易受外部因素（如温度、时间及材料浓度等）影响，导致检测时特异性低、灵敏度差。

发明内容

本发明的目的在于提供一种灵敏度高、检测结果更为稳定、可靠的用于检测组织多肽特异性抗原的试剂盒，且该试剂盒可与全自动仪器配套使用，可显著减少操作时间，降低人为操作误差。

为实现上述目的，本发明可采取下述技术方案：

本发明所述的用于检测组织多肽特异性抗原的试剂盒，包括示踪标记物标记的酶标抗体和包被有TPS抗体的磁珠；

其中的示踪标记物为辣根过氧化物酶（HRP）、碱性磷酸酶（ALP）、鲁米诺及其衍生物、异鲁米诺及其衍生物、吖啶酯或金刚烷中的至少一种，实际制备时，可优选采用辣根过氧化物酶。

所述磁珠为粒径在0.1~5μm之间、可通过表面改性带有一种或多种活性功能基团（包括但不限于-OH、-COOH、-NH₂等）的Fe₂O₃或Fe₃O₄磁性纳米粒子与高分子有机材料的复合体，形成具有超顺磁性和极大蛋白吸附容量的微米级固相磁珠，具有在磁场作用下可迅速被磁化，在离开磁场后剩余磁性为零的属性；其生产所用的高分子有机材料的种类没有特殊限制，可根据需要进行选择。

所述包被磁珠的TPS抗体和示踪标记物标记的酶标抗体为抗TPS单克隆抗体和/或抗TPS多克隆抗体。

所述包被磁珠的TPS抗体浓度为2-100ug/L；示踪标记物标记的酶标抗体的浓度为1/1000-1/8000。