[发明专利]一种白浅灰链霉菌及其生防菌剂的制备方法与应用在审
申请号: | 201811577573.5 | 申请日: | 2018-12-20 |
公开(公告)号: | CN109913384A | 公开(公告)日: | 2019-06-21 |
发明(设计)人: | 吕超田;花日茂;潘月敏;周晶;付敏 | 申请(专利权)人: | 蚌埠学院 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A01N63/02;A01P3/00;C12R1/465 |
代理公司: | 蚌埠鼎力专利商标事务所有限公司 34102 | 代理人: | 王琪 |
地址: | 233030 *** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 白浅灰链霉菌 保藏 生防菌剂 孢子悬液 制备 高氏一号培养基 固体发酵培养基 中国微生物菌种 种子液培养基 辣椒灰霉病 微生物中心 无农药残留 种子液接种 发酵培养 摇瓶培养 抗药性 研磨 无菌水 种子液 风干 孢子 目筛 下曲 接种 保存 防治 应用 管理 | ||
1.一种白浅灰链霉菌,其特征在于:所述的白浅灰链霉菌(Streptomycesalbogriseus)Ah11601保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.11363。
2.根据权利要求1所述的一种白浅灰链霉菌的生防菌剂,其特征在于:由所述的白浅灰链霉菌Ah11601经过制备孢子悬液、种子液培养、固体发酵培养制得。
3.根据权利要求2所述的一种白浅灰链霉菌的生防菌剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)孢子悬液制备:将无菌水加入保存有白浅灰链霉菌Ah11601高氏一号培养基的斜面上,待白浅灰链霉菌Ah11601产孢时刮去孢子,倒入锥形瓶中震荡混匀,得到孢子悬液,控制孢子悬液的菌体浓度为108-109cfu/mL;
所述的高氏一号培养基中有效组分浓度:可溶性淀粉20g/L、硝酸钾1g/L、磷酸氢二钾0.5g/L、氯化钠0.5g/L、硫酸镁0.5g/L、硫酸亚铁0.01g/L;
(2)种子液培养:将步骤(1)所得的孢子悬液接种到种子液培养基中,接种量占种子液培养基体积分数的1-3%,然后在28℃,140-220r/min的转速下摇瓶培养50-90h,得到种子液;
所述种子液培养基中有效组分浓度:蛋白胨5g/L、酵母粉5g/L、淀粉5g/L、玉米粉10g/L、磷酸氢二钾5g/L、硫酸镁3g/L、氯化钠1g/L;
(3)固体发酵培养:将所述种子液按接种量体积质量比5-15%接种到含水量60%的固体发酵培养基中,在28℃下曲盘发酵培养5-8天,然后在20-30℃下风干并用粉碎机研磨,过120目筛,收集通过筛网的粉末,于室温阴暗处储存,得到白浅灰链霉菌Ah11601生防菌剂;
所述固体发酵培养基中有效组分质量分数:稻草粉20%,麸皮40%,玉米粉15%,豆饼粉10%,碳酸钙0.5%,磷酸氢二钾0.5%,硫酸镁0.25%,氯化钠0.1%。
4.根据权利要求3所述的一种白浅灰链霉菌的生防菌剂的制备方法,其特征在于:
步骤(2)中孢子悬液的接种量占种子液培养基体积分数的1-1.5%,摇瓶转速为160-200r/min,培养时间为60-80h;
步骤(3)中种子液按接种量体积质量比8-12%接种到含水量60%的固体发酵培养基中,在28℃下曲盘发酵培养6-7天,发酵期间维持空气相对湿度70%,发酵期间翻倒2-3次,发酵后在25-30℃下风干。
5.根据权利要求4所述的一种白浅灰链霉菌的生防菌剂的制备方法,其特征在于:
步骤(2)中孢子悬液的接种量占种子液培养基体积分数的1-1.5%,摇瓶转速为1200r/min,培养时间为80h;
步骤(3)中种子液按接种量体积质量比10%接种到含水量60%的固体发酵培养基中,在28℃下曲盘发酵培养6天,发酵期间维持空气相对湿度70%,发酵期间翻倒3次,发酵后在28℃下风干。
6.根据权利要求2所述的一种白浅灰链霉菌的生防菌剂在防治辣椒灰霉病中的应用。
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