[发明专利]一种螺旋霉素产生菌、可利霉素产生菌、构建方法、应用及提高产物产量的方法

说明书

本发明属于微生物基因工程领域，公开了一种螺旋霉素产生菌、可利霉素产生菌、构建方法、应用及提高产物产量的方法。本发明提供的螺旋霉素产生菌的菌株中的Lrp基因失活(Δlrp‑SP)，菌株的保藏号为CGMCC No.16056；本发明提供的可利霉素产生菌的菌株中的Lrp基因失活(Δlrp‑BT)，菌株的保藏号为CGMCC No.16055。本发明通过使Lrp基因失活，提高了螺旋霉素和可利霉素的产量，尤其是可利霉素的主组分4”‑异戊酰螺旋霉素Ⅲ的产量和比例明显提高。

技术领域

本发明属于微生物基因工程领域，涉及一种螺旋霉素产生菌、可利霉素产生菌、构建方法、应用及提高产物产量的方法，具体涉及调控基因的运作与提高抗生素产量及有效组分的方法及其应用。

背景技术

可利霉素曾用名生技霉素、必特螺旋霉素，是利用合成生物学技术，将碳霉素产生菌 (Streptomyces thermotolerans)中4”-异戊酰基转移酶基因(ist)在螺旋霉素产生菌(Streptomyces spiramyceticus F21)中进行克隆表达，获得的基因工程菌(Streptomycesspiramyceticus WSJ-1)的发酵产物[专利号：ZL971044406、ZL021487715]。可利霉素为多组分抗生素，以4”-异戊酰螺旋霉素Ⅲ、Ⅱ、Ⅰ为主组分，其中Ⅲ、Ⅱ、Ⅰ组分以3位OR基团，依次为丙酰基、乙酰基、羟基而命名。可利霉素结构式如下：

可利霉素结构式

异戊酰螺旋霉素Ⅲ：R＝COCH₂CH₃ R′＝COCH₂CH(CH₃)₂

异戊酰螺旋霉素Ⅱ：R＝COCH₃ R′＝COCH₂CH(CH₃)₂

异戊酰螺旋霉素Ⅰ：R＝H R′＝COCH₂CH(CH₃)₂

可利霉素作为一类新药已近入新药审批阶段，其质量标准中规定Ⅲ组分应不低于30％。