[发明专利]一种双酚A电化学发光适配体传感器的制备方法及应用

权利要求书

1.一种双酚A电化学发光适配体传感器的制备方法，其特征在于，步骤如下：

(1)NCDs@PEI-rGO复合材料的制备：

首先，将柠檬酸、尿素和聚乙烯亚胺PEI加入到二次水中，置于微波炉中反应，反应结束后，冷却至室温后，得到的产物再次溶于二次水，离心，得到的上层溶液，经透析，真空干燥，得到的NCDs@PEI；

将NCDs@PEI溶液加入到等体积的rGO溶液中，混合超声，制备均一的NCDs@PEI-rGO溶液，放置室温备用；

(2)将玻碳电极依次用不同粒径的三氧化二铝粉末打磨，在乙醇和水中超声后于空气中干燥；

(3)将发光体Ru(bpy)₃²⁺的有机相溶液修饰到步骤(2)制备的玻碳电极表面，并在空气中干燥，待到钌相的有机溶剂挥发后形成RuNSs；

(4)然后将NCDs@PEI-rGO的溶液修饰到步骤(3)制备的电极表面，室温下晾干；

(5)在步骤(4)制备的电极上滴加全氟磺酸溶液，室温下晾干后形成膜；

(6)将步骤(5)修饰好的电极浸泡在HAuCl₄中，从-0.3V到-0.1V电位下进行电镀，时间控制在15s到30s内，在电极表面修饰上一层Au粒子AuPs，用于连接BPA适配体；

(7)在一定温度下，将巯基功能化的BPA适配体反应在步骤(6)修饰好的电极上，通过Au-S共价键固定在电极表面；形成自组装电极；

(8)在一定温度下，将步骤(7)制备的自组装电极浸入牛血清白蛋白BSA溶液中孵育，以阻断剩余的非特异性结合位点，制得基于RuNSs-NCDs@PEI的电化学发光适配体传感器。

2.根据权利要求1所述的双酚A电化学发光适配体传感器的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，柠檬酸、尿素、聚乙烯亚胺PEI和二次水中的用量比例为3g：3g：6g：10mL，微波炉功率为800W，反应时间为5min，NCDs@PEI溶液的浓度为2mg·mL^-1，rGO溶液的浓度为2mg·mL^-1，NCDs@PEI-rGO溶液的浓度为1mg·mL^-1。

3.根据权利要求1所述的双酚A电化学发光适配体传感器的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，玻碳电极的直径d＝3mm；所用的三氧化二铝粉末的粒径依次为0.3μm和0.05μm。

4.根据权利要求1所述的双酚A电化学发光适配体传感器的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，Ru(bpy)₃²⁺的有机相溶液的浓度为0.5mmoL·L^-1，用量为3μL；所述的有机溶剂为乙腈和正丙醇体积比为5:1的混合溶液。

5.根据权利要求1所述的双酚A电化学发光适配体传感器的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，NCDs@PEI-rGO的溶液的浓度为1mg·mL^-1，用量为3μL。

6.根据权利要求1所述的双酚A电化学发光适配体传感器的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，全氟磺酸(Nafion)溶液的浓度为0.5wt％，用量为3μL。

7.根据权利要求1所述的双酚A电化学发光适配体传感器的制备方法，其特征在于，步骤(6)中，HAuCl₄的质量百分浓度为1％。

8.根据权利要求1所述的双酚A电化学发光适配体传感器的制备方法，其特征在于，步骤(7)中，巯基功能化的BPA适配体的浓度为0.5～2.0μmoL·L^-1，用量为3μL；反应温度为4℃，反应时间为12-18h。

9.根据权利要求1所述的双酚A电化学发光适配体传感器的制备方法，其特征在于，步骤(8)中，牛血清白蛋白BSA溶液的质量百分浓度为1％；孵育的温度为37℃，孵育的时间为10-60min。