[发明专利]一种PCT浓度检测试剂盒及其制备方法

说明书

本发明公开了一种PCT浓度检测试剂盒及其制备方法，所述PCT浓度检测试剂盒包括磁珠标记抗体、分析缓冲液、酶结合物和校准品，所述酶结合物中添加氯化钠，所述分析缓冲液中添加铁氰化钾。本发明通过所述酶结合物中添加氯化钠，同时，所述分析缓冲液中添加铁氰化钾，解决了现有PCT试剂盒在检测新鲜样本时抗干扰能力差的问题。

技术领域

本发明涉及降钙素原(PCT)浓度检测技术领域，具体涉及一种PCT浓度检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

降钙素原(procalcitionin，检测PCT)是一种由116个氨基酸组成、分子量为13kDa的糖蛋白，是血清降钙素(CT)的前体物，在人体内半衰期约为20-24小时，稳定性好。正常条件下，PCT在甲状腺C细胞中生成并裂解成降钙素，人血清PCT含量极低，约2.5pg/ml。当严重细菌、真菌、寄生虫感染以及脓毒症和多脏器功能衰竭时，PCT在血浆中的水平升高。自身免疫、过敏和病毒感染时PCT不会升高。局部有限的细菌感染、轻微的感染和慢性炎症不会导致PCT升高。

PCT检测试剂盒主要包括磁珠标记抗体、分析缓冲液、酶结合物和校准品。

现有的PCT检测试剂盒具有以下缺陷：

1、配套使用的校准品试剂一般为冻干粉使用不便，稳定性略差，稀释时可能存在误差或导致污染。

2、新鲜样本不同程度干扰导致检测结果存在较大的差异，现有PCT免疫检测试剂检测新鲜样本的抗干扰能力有所欠缺。

发明内容

本发明的目的在于提供一种PCT浓度检测试剂盒及其制备方法，解决现有PCT试剂盒在检测新鲜样本时抗干扰能力差的问题。

此外，本发明还提供上述检测试剂盒的制备方法。

一种PCT浓度检测试剂盒，包括磁珠标记抗体、分析缓冲液、酶结合物和校准品，所述酶结合物中添加氯化钠，所述分析缓冲液中添加铁氰化钾。

本发明采用全自动磁微粒化学发光检测方法，按照夹心法原理进行免疫检测。磁微粒上包被生物素抗体，抗体为鼠的单克隆抗体。

本发明所述磁珠标记抗体、分析缓冲液、酶结合物和校准品为现有PCT浓度检测试剂盒(沃文特公司生产的试剂盒)中试剂。

本发明通过试验证明：向酶结合物中添加氯化钠能够消除临床新鲜样本的检测干扰，向分析缓冲液中添加铁氰化钾能够消除临床新鲜样本的检测干扰，向酶结合物中添加氯化钠，同时向分析缓冲液中添加铁氰化钾，能够有效消除临床新鲜样本的检测干扰。

本发明通过所述酶结合物中添加氯化钠，同时，所述分析缓冲液中添加铁氰化钾，解决了现有PCT试剂盒在检测新鲜样本时抗干扰能力差的问题。

进一步地，酶结合物中氯化钠的浓度为0.03-0.05g/ml。

申请人通过长期试验发现：酶结合物中氯化钠的最佳浓度为0.03-0.05g/ml。

其中，优选为0.03g/ml，防止盐离子浓度过高抑制抗原抗体免疫反应及利于节约氯化钠。

进一步地，分析缓冲液中铁氰化钾的浓度为0.1g/L。

申请人通过长期试验发现：分析缓冲液中铁氰化钾的最佳浓度为0.1g/L。

进一步地，酶结合物中氯化钠的浓度为0.03-0.05g/ml，所述分析缓冲液中铁氰化钾的浓度为0.1g/L。

进一步地，校准品中添加酪蛋白或牛血清白蛋白。

本发明通过向10ml校准品中添加0.10g酪蛋白或牛血清白蛋白，能够明显提高校准品稳定性。

其中，添加酪蛋白的效果最佳。