[发明专利]一种用高效液相色谱法测定盐酸瑞芬太尼原料中酸残留的方法

说明书

本发明提供一种用高效液相色谱法测定盐酸瑞芬太尼原料中酸残留的方法，配制乙酸、丙酸、丙烯酸对照品溶液，分别或共同置于容器中；取供试品溶液注入高效液相色谱仪，供试品色谱图中出峰时间及峰形与对照品溶液色谱图中乙酸、丙酸、丙烯酸的出峰时间及峰形进行比对，判定供试品溶液是否含有乙酸、丙酸、丙烯酸，将峰面积数值代入线性方程，计算出盐酸瑞芬太尼中酸的含量。本方法通过筛选波长，找到了三者的最大吸收，并利用乙腈/水二元流动相，通过调节pH值或者调节两相配比，选择合适的PH值及两相比例来调控乙酸、丙酸、丙烯酸在色谱柱上的保留时间，提高乙酸、丙酸、丙烯酸的分离度及理论塔板数，改善色谱峰型，且空白溶剂不干扰三者的检测。

技术领域

本发明涉及一种测定盐酸瑞芬太尼中酸残留的方法，具体为采用高效液相色谱法检测盐酸瑞芬太尼中乙酸、丙酸、丙烯酸的残留的方法。

背景技术

盐酸瑞芬太尼(Remifentanil Hydrochloride)，化学名称为4-(甲氧羰基)-4-[(1-氧丙基)苯氨基]-1-哌啶丙酸甲酯盐酸盐，属于新型阿片类镇痛药，具有起效快、体内无蓄积、血药浓度平稳、作用时间短、镇痛效价强、病人用药后恢复迅速、不良反应轻等优点。临床上主要用于全麻诱导和全麻中维持镇痛。

结构式如下所示：

从上述结构式中可以看出，盐酸瑞芬太尼存在一个丙酸甲酯的支链，现有技术中多采用丙烯酸甲酯作为加成试剂，引入该支链，参见(毕小玲，盐酸瑞芬太尼的合成，中国化学药物杂志，第12卷，第六期，P354-354)。

本申请人采用丙烯酸甲酯作为加成试剂合成盐酸瑞芬太尼，对成品质量进行检测时发现盐酸瑞芬太尼成品中往往会出现少量的不明杂质峰，通过进一步研究确证这些杂质峰包括乙酸、丙酸和丙烯酸。乙酸是反应过程中的溶剂残留，而丙酸和丙烯酸则是加成试剂丙烯酸甲酯水解后得到的产物。2015版中国《药典》通则0861残留溶剂测定法中附表1对乙酸溶剂残留的含量进行了限定，但并未对丙酸和丙烯酸的含量进行限定，也无相应测定方法指导，虽然这三种酸的含量非常微小，但其残留量的控制对提高产品质量却非常重要，是影响产品质量的重要因素。且现有技术中并未有对盐酸瑞芬太尼产品中的上述三种酸残留的测定方法的记载。

发明内容

本发明的技术方案利用高效液相色谱法测定盐酸瑞芬太尼原料中酸残留的检测方法，利用高效液相色谱仪，通过外标法对盐酸瑞芬太尼中的乙酸、丙酸、丙烯酸进行定性、定量检测。本方法通过筛选波长，找到了三者的最大吸收，并利用乙腈/水二元流动相(其中水相中添加磷酸二氢钾)，通过调节pH值或者调节两相配比，选择合适的pH值及两相比例来调控乙酸、丙酸、丙烯酸在色谱柱上的保留时间，提高乙酸、丙酸、丙烯酸的分离度及理论塔板数，改善色谱峰型，且空白溶剂不干扰三者的检测。本方法简单，高效，该方法同时检测了三种酸，为控制盐酸瑞芬太生产工艺中乙酸、丙酸、丙烯酸的检测提供了质量标准的检测方法。具体检测方法如下：

一种用高效液相色谱法测定盐酸瑞芬太尼原料中酸残留的方法，所述的酸为乙酸、丙酸、丙烯酸，包括如下步骤：

(1)制备对照物质：量取乙酸对照品溶液，丙酸对照品溶液，丙烯酸母对照品溶液分别、以及共置量瓶中，用流动相稀释并定容，摇匀；

(2)制备供试品溶液：取盐酸瑞芬太尼原料用流动相溶解、定容，摇匀；

(3)混合对照品溶液：精密量取乙酸对照品溶液1ml，丙酸对照品溶液1ml，丙烯酸母对照品溶液0.1ml共置10ml量瓶中，用流动相稀释并定容，摇匀，对照品溶液浓度如下：

Cr_乙酸＝0.05mg/ml

Cr_丙酸＝0.03mg/ml

Cr_丙烯酸＝0.0053mg/ml

系统适用性试验