[发明专利]一种脾氨肽的制备方法

权利要求书

1.一种脾氨肽的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

步骤a、将新鲜牲畜脾脏处理成碎块，作为原料；

步骤b、依次用脂肪酶、内切蛋白酶、外切蛋白酶对所述原料进行酶解；其中所述脂肪酶为微生物脂肪酶和固定化脂肪酶；

步骤c、固液分离，将所得液体进行脱脂纯化，纳滤，浓缩纯化。

2.根据权利要求1所述的脾氨肽的制备方法，其特征在于，步骤a中将牲畜脾脏处理成碎块的方法为冷冻后粉碎。

3.根据权利要求1所述的脾氨肽的制备方法，其特征在于，步骤b中所述微生物脂肪酶为霉实假单胞菌产脂肪酶，所述固定化脂肪酶为固定化脂肪酶TL1M。

4.根据权利要求3所述的脾氨肽的制备方法，其特征在于，步骤b中所述内切蛋白酶为中性蛋白酶。

5.根据权利要求4所述的脾氨肽的制备方法，其特征在于，所述中性蛋白酶为栖土曲霉蛋白酶。

6.根据权利要求4所述的脾氨肽的制备方法，其特征在于，所述外切蛋白酶为乳酸菌氨肽酶。

7.根据权利要求6所述的脾氨肽的制备方法，其特征在于，步骤b中酶解的具体操作为：向所述原料中加入相当于所述原料重量4～6倍的纯化水，搅拌均匀，升温至35～40℃，加入相当于所述原料重量0.5～1.0％的所述霉实假单胞菌产脂肪酶，保持20～30min，再升温至55～60℃，加入相当于所述原料重量0.4～0.8％的所述固定化脂肪酶TL 1M和相当于所述原料重量1～1.5％的所述中性蛋白酶，保持20～30min，然后加入相当于所述原料重量0.3～0.5％的所述乳酸菌氨肽酶，保持3.0～4.0h，最后升温至90～95℃，保持10～15min灭酶。

8.根据权利要求1所述的脾氨肽的制备方法，其特征在于，在步骤c中：

所述固液分离的操作为离心后过滤，离心转速为3400～3800r/min；和/或

所述脱脂纯化在三相离心机中进行；和/或

所述浓缩纯化的操作为：将纳滤后的滤液浓缩，用离子过滤器纯化，用双效浓缩器进一步浓缩；和/或

所述纳滤的具体操作为：先用孔径为0.45～0.55nm的纳滤膜过滤，滤液用孔径为0.18～0.22nm的纳滤膜脱盐。

9.根据权利要求1所述的脾氨肽的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括将步骤c所得产物进行冻干。

10.根据权利要求9所述的脾氨肽的制备方法，其特征在于，所述冻干的程序为：在-45～-40℃预冻1.25～1.35h，再在-42℃～-20℃、真空度0.10～0.15mbar条件下冻干7.8～8.3h，然后在-10℃～-30℃、真空度0.15mbar～0.25mbar条件下解析冻干3h～4h，即得到脾氨肽冻干产品。