[发明专利]用于分离单细胞的试剂盒及其应用在审
| 申请号： | 201811594158.0 | 申请日： | 2018-12-25 |
| 公开（公告）号： | CN109694845A | 公开（公告）日： | 2019-04-30 |
| 发明（设计）人： | 吴文铭;彭俊雅;陈澔;黄丹;刘路路;洪夏飞;丛林;李冬晶;赵玉沛 | 申请（专利权）人： | 中国医学科学院北京协和医院 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C12N5/09 |
| 代理公司： | 北京润平知识产权代理有限公司 11283 | 代理人： | 刘依云;王崇 |
| 地址： | 100730 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 试剂盒 脱氧核糖核酸酶 胰蛋白酶抑制剂 中性蛋白酶 胰腺组织 胶原酶 收率 应用 酶活力单位 酶工程 胰腺 | ||
1.一种用于分离单细胞的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括VIII型胶原酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶抑制剂和脱氧核糖核酸酶，其中，所述VIII型胶原酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶抑制剂和脱氧核糖核酸酶的酶活力单位之间的比值为50-90:0.5-1:2000-5000:1。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其中，所述中性蛋白酶为Dispase II；
和/或，所述脱氧核糖核酸酶为DNaseI。
3.根据权利要求1所述的试剂盒，其中，所述VIII型胶原酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶抑制剂和脱氧核糖核酸酶各自独立地以粉剂的形式提供；
或者，所述VIII型胶原酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶抑制剂以混合粉剂的形式提供，且所述脱氧核糖核酸酶以单独粉剂的形式提供；
或者，所述VIII型胶原酶与脱氧核糖核酸酶以独立于其它成分的方式提供。
4.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其中，所述试剂盒还包括溶剂，相对于每毫克的VIII型胶原酶，所述溶剂的含量至少为0.1mL，优选为0.2-3mL。
5.根据权利要求4所述的试剂盒，其中，所述溶剂为含有4-10体积％胎牛血清的磷酸盐缓冲液。
6.根据权利要求1所述的试剂盒，其中，所述试剂盒还包括组织保存液、红细胞裂解液和洗液中的至少一种。
7.根据权利要求6所述的试剂盒，其中，组织保存液为含有胎牛血清和蛋白酶抑制剂的无血清细胞冻存培养基。
8.根据权利要求6所述的试剂盒，其中，所述洗液为含有0.02-0.08重量％牛血清蛋白的磷酸盐缓冲液。
9.权利要求1-8中任意一项所述的试剂盒在从胰腺样品中分离单细胞中的应用，特别是在制备用于从胰腺样品中分离单细胞的医疗器具中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其中，所述胰腺样品为正常胰腺组织和/或胰腺肿瘤组织。
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