[发明专利]一种抗菌肽、抗菌肽水凝胶及其制备方法

说明书

本发明涉及生物制药技术领域，特别涉及一种抗菌肽、抗菌肽水凝胶及其制备方法。本发明所述抗菌肽氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。实验表明本发明所述多肽具有较高的抗菌活性和优异的生物相容性。本发明所述抗菌肽水凝胶由抗菌肽、光热试剂和伤口促生长因子制成。试验表明，所述抗菌肽水凝胶对生物膜表面的细菌尤其是耐药细菌具有很好的杀伤作用，能够有效裂解、清除细菌生物膜，促进伤口表皮细胞的生长增殖、胶原形成和血管的新生，实现细菌生物膜感染伤口的快速愈合。

技术领域

本发明涉及生物制药技术领域，尤其涉及一种抗菌肽、抗菌肽水凝胶及其制备方法。

背景技术

人体皮肤受伤后，正常的组织愈合会经历止血、炎症、增生和组织重塑等过程。伤口的这一系列愈合过程不仅复杂，而且脆弱，容易受到各种因素的干扰而停滞，从而形成慢性伤口。慢性伤口感染构成了人类感染性疾病的60～80％，另外随着社会人口老龄化和糖尿病、肥胖等疾病患病率的不断增加，慢性伤口已经成为全球卫生健康的主要问题之一。在慢性伤口中，细菌生物膜感染是比较常见的一种情况。细菌生物膜是指细菌为了适应生存环境黏附于机体组织表面形成的，由细菌和它所分泌的胞外聚合物(多糖、蛋白质、核酸等)组成的膜状细菌群体。与处在浮游状态的细菌相比，生物膜中细菌的耐药性更强，且可以逃避宿主免疫系统的攻击，导致感染迁延不愈，另外细菌还可自生物膜处向外散播，引发其他部位的感染。对细菌生物膜感染伤口的不恰当治疗往往会造成身体的截肢，因此开发细菌生物膜感染伤口的治疗方法具有重要的研究价值。

目前治疗细菌生物膜感染伤口的方法主要分为两大类：机械清创与抗菌药物治疗。机械清创指通过手术的方式来对感染伤口的创面进行深部处理，来实现清除细菌生物膜的目的。抗菌药物治疗是指通过在伤口处添加抗菌药物，来实现对细菌生物膜的杀伤。常用的抗菌药物主要有纳米银制剂、抗生素及抗菌肽等。其中，纳米银主要靠释放银离子来杀灭细菌；抗生素主要依靠结合到细菌细胞壁上，并通过阻止细菌的代谢途径来杀菌；抗菌肽是生物体内经诱导产生的一种具有生物活性的小分子多肽，通过破坏细菌的细胞膜结构来实现杀菌的目的。然而上述方法均有各自的缺点，其中，机械清创无法完全去除生物膜，而任何残留都会使生物膜很快恢复；由于生物膜的多重耐药机制，抗生素很难实现对细菌生物膜完全杀伤；纳米银制剂和现有的抗菌肽(如防御素)在杀灭细菌的同时，也会对正常组织产生无法忽视的毒性。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种抗菌活性高、细胞毒性小的一种抗菌肽、抗菌肽水凝胶及其制备方法。

为了实现本发明的目的，本发明采用如下技术方案：

本发明提供一种抗菌肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

在一些实施方案中，所述抗菌肽氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，命名为抗菌肽1。

在一些实施方案中，所述抗菌肽氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示，命名为抗菌肽2。

本发明采用固相合成法制备抗菌肽1，其氨基酸序列为：(氨基端)Ile-Lys-Tyr-Leu-Ser-Val-Asn(羧基端)，在合成过程中，首先将Fmoc-天冬酰胺的羧基以共价键的结构同一个不溶性的高分子树脂(作为固相载体)相连，然后经过脱保护将天冬酰胺的氨基与Fmoc-缬氨酸的羧基经过缩合形成肽键，重复上述肽键的形成反应，逐步将丝氨酸、亮氨酸、酪氨酸、赖氨酸及异亮氨酸连接到树脂上，使肽链从羧基端向氨基端生长，直至达到所需要的肽链长度，最后用氢氟酸将肽链从树脂上切割下来，得到抗菌肽1。