[发明专利]人子宫内膜间充质干细胞在改善损伤心肌细胞上的应用

说明书

本发明涉及了人子宫内膜间充质干细胞在改善损伤心肌细胞上的应用。将人子宫内膜间充质干细胞以PBS重悬制成干细胞制剂注射到造模大鼠的心肌损伤局部，心脏彩超观察心功能变化、PET‑CT观察心肌细胞活性及能量代谢、Masson染色观察纤维化程度，显示与人骨髓间充质干细胞比较，人子宫内膜间充质干细胞具有更好的改善心肌细胞活性、能量代谢、心肌纤维化等作用，最终达到修复损伤心肌的目的。本发明提供的人子宫内膜间充质干细胞制剂可以作为改善损伤心肌细胞活性和功能的药物应用于心血管系统疾病中。

技术领域

本发明涉及一种间充质干细胞，特别是一种人体子宫内膜来源的间充质干细胞。本发明的人子宫内膜间充质干细胞能够改善损伤心肌细胞的活性和功能，从而可以更好地修复因心肌细胞功能障碍所致的心脏疾病。

背景技术

随着经济的加速发展，人类生活方式和饮食结构不断发生变化，冠状动脉粥样硬化性心脏病呈持续增长趋势。其可以引起局部心肌细胞凋亡、心肌细胞纤维化、能量代谢障碍等，最终发生心力衰竭。而心力衰竭严重影响人们的生活质量，是造成人类死亡的重要原因。

干细胞是一种具有自我复制、更新和多向分化潜能的细胞，具有修复受损组织细胞的潜能，近年来已成为疾病治疗和组织工程领域理想的种子细胞，是各种疾病尤其是各种难治性疾病可能的新的有效治疗方法。

再生医学不断发展，干细胞移植修复损伤心肌细胞已成为心血管系统疾病最有前景的治疗方法。其中，心肌功能的重塑是关键，包括心肌细胞活性的改善、心肌细胞能量代谢的改善、心肌纤维化的改善等。

通过再生医学能够达到有效改善损伤心肌活性和功能的理想种子细胞，除了应具有增殖能力强，分化良好，免疫原性低，容易获取以及分泌能力强大等特点外，最主要的是应该具有强的成血管能力。

201810930181.6专利申请涉及一种人子宫内膜组织来源间充质干细胞的分离培养方法，其从人子宫内膜组织中分离培养得到一种具有强修复再生能力的人子宫内膜间充质干细胞，并证明该间充质干细胞具有更强的增殖能力，即具有更强的活力，具备快速获得更多种子细胞的能力。

发明内容

本发明的目的是提供人子宫内膜间充质干细胞在改善损伤心肌细胞上的应用。

发明人通过小鼠研究显示，结扎小鼠左冠状动脉后，小鼠的子宫细胞归巢到心肌损伤区参与心肌细胞修复并改善心功能，以及子宫源性的细胞能显著增加血管形成。因此，在人体子宫中存在具有强修复再生能力的干细胞。

发明人已经从人体的子宫内膜组织中分离培养出人子宫内膜间充质干细胞。本发明进一步验证了这种人子宫内膜间充质干细胞具有更强的促血管形成能力，可以更好的改善损伤心肌细胞活性、改善损伤心肌能量代谢及纤维化程度。

基于此，本发明将所培养得到的人子宫内膜间充质干细胞作为改善损伤心肌细胞的药物进行应用。

具体地，本发明是将培养出的人子宫内膜间充质干细胞用PBS重悬后，混匀制成用于改善损伤心肌细胞的人子宫内膜间充质干细胞制剂。

更具体地，本发明是采用培养出的P3～P6代人子宫内膜间充质干细胞制备所述人子宫内膜间充质干细胞制剂。

本发明所制备的人子宫内膜间充质干细胞制剂中，优选每1ml干细胞制剂中含有(3～7)×10⁷个人子宫内膜间充质干细胞。

本发明从体外和在体两方面进行了上述人子宫内膜间充质干细胞制剂改善损伤心肌细胞活性和功能的验证研究。

将添加有人子宫内膜间充质干细胞培养上清的脐静脉内皮细胞单细胞悬液接种于Matrigel基质胶上，通过体外实验证明了人子宫内膜间充质干细胞可以促进脐静脉内皮细胞在Matrigel上的小管形成。