[发明专利]异源生产线性三萜的方法

权利要求书

1.一种灵芝线性三萜合成基因cyp505d13，其特征在于，其核苷酸序列如Seq ID No.1所示，所述基因编码蛋白的氨基酸序列如Seq ID No.2所示。

2.一种线性三萜类化合物的异源合成方法，其特征在于，通过将权利要求1所述的cyp505d13基因克隆到酵母表达质粒，并将酵母表达质粒转化至重组酿酒酵母中进行异源表达，从而实现线性三萜的异源生物合成；

所述的线性三萜类化合物，其分子式及结构式具体为：

①C₃₀H₅₀O₃

②C₃₀H₅₀O₃

③C₃₀H₅₀O₂

3.根据权利要求2所述的方法，其特征是，所述的异源表达具体是指：通过PCR扩增cyp505d13基因的表达序列片段以同源重组的方法将表达载体pRS426、所述表达序列片段、酵母HXT7p启动子和酵母FBA1t终止子重组连接，得到重组表达质粒，进一步转化至重组酿酒酵母中以生产线性三萜。

4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征是，所述的转化，通过标准的醋酸锂转化法进行发酵筛选。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征是，所述的重组酿酒酵母采用工程改造后的BY4742菌株YL-T3，其结构为：Δtrp1,δDNA::PPGK1-tHMG1-TADH1-PTEF1-LYS2-TCYC1,TRP::HIS-PPGK1-ERG20-TADH1-PTEF1-ERG9-TCYC1-PTDH3-ERG1-TTPL1，即在BY4742菌株上过表达角鲨烯生物合成途径上游的tHMG1基因、ERG20基因、ERG9基因和ERG1基因。

6.一种根据权利要求1所述灵芝线性三萜合成基因cyp505d13的应用，其特征在于，通过将其异源表达至重组酿酒酵母中进行线性三萜的发酵生产。