[发明专利]一种乌苯美司合成中的杂质及其制备方法

说明书

本发明提供了一种乌苯美司原料药中的杂质，该杂质的结构得以确认，有利于乌苯美司的质量控制以获得高质量的乌苯美司原料药。本发明还提供了该杂质的制备方法，该方法制备得到的产品纯度高，能够作为乌苯美司原料药质量研究过程的杂质对照品使用。

技术领域

本发明涉及药物合成方法领域，具体涉及一种乌苯美司原料药合成中产生的一种杂质N-[(2S,3R)-3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酰]-L-异亮氨酸及其制备方法。

背景技术

乌苯美司(Ubenimex；Bestatin)是从橄榄网状链霉菌的培养液中分离而得的一种低分子二肽化合物，它具有抑制肿瘤细胞表面氨基肽酶B、N和亮氨酸氨基肽酶作用，诱导肿瘤细胞凋亡和促进宿主细胞免疫功能，增强抗癌作用的双重功能，于1987年在日本上市。乌苯美司在临床上常和其他化疗药物联合应用于急性髓性的白血病、慢性髓性的白血病、肺鳞癌、恶性黑色素瘤、胃瘤等的治疗；和放疗联合，用于鼻咽癌等肿瘤疾病的治疗，还用于各种因素引起的免疫功能低下者，试用于骨髓发育不良综合症及单纯红细胞再生不良症的治疗。各种临床结果反馈该药物在增强人体免疫能力方面具有显著疗效，乌苯美司能显著提高癌症患者的生存率，改善其生活质量。乌苯美司化学名为N-[(2S,3R)-4-苯基-3-氨基-2-羟基丁酰]-L-亮氨酸，结构式如式Ⅰ所示：

最早合成乌苯美司的方法是生物化学的细菌发酵方法，由Umezawa H等公开于J.Antibiot.1976,29,97。随着全球对乌苯美司需求不断增加，仅通过发酵生产乌苯美司已经不能满足药品市场的需求，而利用化学合成的方法更有利于工业化生产，越来越多的化学合成方法被报道。但由于乌苯美司结构复杂，结构中的肽键对酸碱敏感，且高温下不稳定，已报道的一些合成路线需要使用昂贵实际和危险化学品或产品纯度太低，因此能应用于工业化生产的路线目前只有一条，由抗生素杂志(Journal of Antibiotics，1983,36(6)：695-699)发表，反应路线为：

乌苯美司含有三个手性中心，因此合成得到的乌苯美司原料药中可能含有有7个光学异构体杂质，此外合成过程中还会产生例如式Ⅵ、Ⅶ化合物等一系列的衍生物杂质。

合成过程中可能产生的如此多光学异构体以及衍生物杂质，导致乌苯美司原料药的质量控制存在难度，难以生产出高质量的乌苯美司原料。而且，发明人在制备乌苯美司原料药过程中发现，得到的产品中除了已公开的杂质外，还存在量极少但对原料药产品质量有影响的杂质。由于量极少难以收集进行结构确证，为乌苯美司原料药的质量控制带来了困难。但为了获得高质量的乌苯美司原料药并进一步制备安全有效的乌苯美司制剂，有必要对该杂质进行结构确证并合成出纯度较高的该杂质化合物用于乌苯美司原料药的质量控制过程。

发明内容

本发明提供了一种乌苯美司原料药中的杂质，该杂质的结构得以确认，有利于乌苯美司的质量控制以获得高质量的乌苯美司原料药。本发明还提供了该杂质的制备方法，该方法制备得到的产品纯度高，能够作为乌苯美司原料药质量研究过程的杂质对照品使用。

本发明提供的一种乌苯美司杂质化合物其特征在于，具有式Ⅱ所示结构式：

式Ⅱ化合物在在制备乌苯美司原料药的过程中产生量极少，发明人通过对合成得到的乌苯美司粗品重结晶精制过滤获得的杂质溶液进行收集，液质联用测试得到的分子量与乌苯美司相同均为308。变换多个色谱条件测试后结果显示该物质均存在，且保留时间均与乌苯美司不同，确认为杂质。为了对该杂质化合物进行结构确证，发明人对反应过程进行分析后进行了多次预测，并合成现有技术已公开的所有光学异构体作为对照品，通过高效液相液相测试对比分析，但均证明该化合物并非乌苯美司的光学异构体。由于乌苯美司的起始原料经检测纯度合格，无明显杂质，所以合成产品中的该杂质的结构确认遇到了困难。