[发明专利]一种胶原蛋白肽的制备方法在审
申请号: | 201811600229.3 | 申请日: | 2018-12-26 |
公开(公告)号: | CN109371092A | 公开(公告)日: | 2019-02-22 |
发明(设计)人: | 张晓东;杨广;杨子丰 | 申请(专利权)人: | 河北肽都生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K14/78;C07K1/36;C07K1/34 |
代理公司: | 石家庄国为知识产权事务所 13120 | 代理人: | 田甜 |
地址: | 056900 河北省邯郸市*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 胶原蛋白肽 酶解 制备 产品分子量 酶解液 脂肪酶 无花果蛋白酶 胰凝乳蛋白酶 储存和运输 规模产业化 定向酶切 分离纯化 生物活性 靶向酶 纯化水 活性肽 生物酶 鱼鳞 灭酶 鱼皮 蒸煮 浓缩 生产 | ||
本发明涉及活性肽提取技术领域,具体公开一种胶原蛋白肽的制备方法。所述制备方法至少包括以下步骤:步骤a、选取鱼鳞或鱼皮为原料,加入纯化水,蒸煮,得到处理料;步骤b、将所述处理料降温至55‑57℃,加入脂肪酶,搅拌酶解20‑40min,然后加入胰凝乳蛋白酶和无花果蛋白酶,搅拌酶解3‑4h,酶解结束后灭酶,得到酶解液;步骤c、将所述酶解液分离纯化、浓缩、干燥得到胶原蛋白肽。本发明采用生物酶靶向酶解、定向酶切法,产品分子量小,产品分子量精准,生物活性高,便于储存和运输,规模产业化生产可行。
技术领域
本发明涉及活性肽提取技术领域,尤其涉及一种胶原蛋白肽的制备方法。
背景技术
胶原蛋白在人体皮肤的健康和美丽中扮演着举足轻重的角色,“人体衰老的过程,就是胶原蛋白流失的过程”,人体内胶原蛋白随着年龄的增长而慢慢减少,所以必须补充外源性的胶原蛋白。胶原蛋白肽是胶原的水解产物,是胶原的最小单元,人体无需消化可以直接吸收,胶原蛋白肽与微量元素有很好的螯合性,可以把钙输送到骨质层,是中老年人补钙佳品。而分子量在180Da-500Da的胶原蛋白肽生物活性最高,可以通过皮肤吸收,透过角质层直达真皮层,常常用于化妆品原料。高活性胶原蛋白肽起到延长皮肤细胞寿命、抑制细胞膜脂质过氧化、抵抗氧化自由基、提高皮肤免疫能力、提高皮肤持水保水能力、促进胶原的合成和真皮细胞透明质酸的合成等多种功效。在水产动物体内胶原蛋白含量高于陆生动物,而鱼鳞鱼皮中的胶原含量最高可超过其蛋白质总量的80%,较鱼体的其它部位要高许多,而生产胶原蛋白肽多以鱼鳞鱼皮为主。
现在胶原蛋白肽的生产工艺中,最主要的方法有酸法、碱法、酶法,以及多种方法结合使用。酸碱法对胶原蛋白的损失较大;而酶解法多采用单一酶制剂,对产品分子量控制不严,活性低,严重影响胶原蛋白肽在医药化工领域中的应用。
发明内容
针对现有酶解法得到的胶原蛋白肽分子量分布宽且活性低的问题,本发明提供一种胶原蛋白肽的制备方法。
为达到上述发明目的,本发明实施例采用了如下的技术方案:
一种胶原蛋白肽的制备方法,所述制备方法至少包括以下步骤:
步骤a、选取鱼鳞或鱼皮为原料,加入纯化水,蒸煮,得到处理料;
步骤b、将所述处理料降温至55-57℃,加入脂肪酶,搅拌酶解20-40min,然后加入胰凝乳蛋白酶和无花果蛋白酶,搅拌酶解3-4h,酶解结束后灭酶,得到酶解液;
步骤c、将所述酶解液经分离、纯化和干燥后得到胶原蛋白肽。
相对于现有技术,本发明提供的胶原蛋白肽的制备方法具有以下优势:
(1)本发明首先采用脂肪酶进行降脂降胆固醇,然后以胰凝乳蛋白酶和无花果蛋白酶复配的双酶对胶原蛋白进行酶解,利用胰凝乳蛋白酶和无花果蛋白酶促使蛋白发生适度定位水解,降低体系中大分子蛋白质的相对聚合度,催化蛋白质部分肽段发生断裂,提高胶原蛋白肽的提取率,控制胶原蛋白肽分子量,实现胶原蛋白肽分子量小,且分布窄,大大提高胶原蛋白肽的应用。
(2)本发明以胰凝乳蛋白酶为内切酶,使蛋白质可以水解成肽片段,并从肽链内部将多肽水解成小片段,以无花果蛋白酶为外切酶,作用于肽链末端的肽键,减小肽链的长度,降低酶解液中疏水氨基酸的比率,进一步提高水解度和改善风味。以胰凝乳蛋白酶和无花果蛋白酶复配的混合酶对胶原蛋白进行水解,发挥不同酶的水解特性,优势互补,实现对胶原蛋白的多位点分解,有利于胶原蛋白肽的水解度,还能提高胶原蛋白的转化率,缩短水解时间,减少由于单酶水解不彻底,造成疏水氨基酸含量较高而易引起的酶解液苦味较重,酶解液风味不足、腥味较重的情况。
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