[发明专利]木糖苷酶及其基因、重组载体、基因工程菌、制备方法和用途在审
申请号: | 201811602414.6 | 申请日: | 2018-12-26 |
公开(公告)号: | CN109762797A | 公开(公告)日: | 2019-05-17 |
发明(设计)人: | 辛凤姣;孙丽超;王凤忠;黄颖;温博婷;姚雪妍 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院农产品加工研究所 |
主分类号: | C12N9/24 | 分类号: | C12N9/24;C12N15/56;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/14;C12P19/02;C12N15/10 |
代理公司: | 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11369 | 代理人: | 史霞 |
地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 木糖苷酶 木糖苷酶基因 基因工程菌 重组载体 制备 氨基酸序列 耐高温性能 低聚木糖 糖苷酶 降解 种木 基因 | ||
1.木糖苷酶,其特征在于,木糖苷酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.木糖苷酶基因,其特征在于,木糖苷酶基因编码权利要求1所述的木糖苷酶。
3.如权利要求2所述的木糖苷酶基因,其特征在于,木糖苷酶基因碱基序列如SEQ IDNO.2所示。
4.如权利要求2所述的木糖苷酶基因的扩增方法,其特征在于,用于扩增的引物对包括:
F:5'-cctggtgccgcgcggcagccatatgaaatatgtaaagattgagagag-3'
R:5'-gtggtggtggtggtggtgctcgagttaataaccggggattttactg-3'。
5.木糖苷酶基因重组载体,其特征在于,包含权利要求2所述的木糖苷酶基因。
6.如权利要求5所述的木糖苷酶基因重组载体,其特征在于,通过将木糖苷酶基因通过限制性酶切位点NdeI和XhoI插入pET-28b载体获得,并且木糖苷酶基因位于His6-tag序列的后端。
7.木糖苷酶基因工程菌,其特征在于,包含权利要求5所述的木糖苷酶基因重组载体。
8.如权利要求7所述的木糖苷酶基因工程菌,其特征在于,通过热激法将权利要求5所述的木糖苷酶基因重组载体转化至大肠杆菌中得到。
9.木糖苷酶的制备方法,其特征在于,包括:培养权利要求7所述的木糖苷酶基因工程菌,诱导木糖苷酶表达,依次用Ni-NTA亲和层析柱、阴离子交换柱和分子筛纯化表达的木糖苷酶。
10.如权利要求1所述的木糖苷酶的用途,其特征在于,用于降解低聚木糖或者用于制备木糖。
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