[发明专利]一种壳聚糖-氧化石墨烯负载聚戊烯醇-富勒烯的纳米复合物的制备方法

说明书

本发明提供了一种壳聚糖‑氧化石墨烯负载聚戊烯醇‑富勒烯的纳米复合物的制备方法，其特点是：(1)将富勒烯和聚戊烯醇的甲苯溶液缓慢滴加到乳化剂中，加热搅拌得到油相；待体系稳定后，加入一定量去离子水转相，随后提高温度，加入大量去离子水，通过超声辅助搅拌，得到聚戊烯醇/富勒烯纳米乳液；(2)将壳聚糖醋酸溶液缓慢滴加进氧化石墨烯水溶液中，加热搅拌后，将叶酸氨水溶液缓慢滴加入其中，加热搅拌完毕，即得壳聚糖‑氧化石墨烯复合物分散液；(3)将步骤(1)、(2)所得的两种液体加热搅拌混合后，将三聚磷酸钠溶液缓慢加入其中，再加热搅拌后，经冷冻真空干燥即得壳聚糖‑氧化石墨烯负载聚戊烯醇‑富勒烯的纳米复合物。

技术领域

本发明涉及一种壳聚糖-氧化石墨烯负载聚戊烯醇-富勒烯的纳米复合物的制备方法，属于生物医药领域。

技术背景

聚戊烯醇(polyprenols，GBP)是以C₅异戊烯基为结构单元的类脂化合物，是生物体细胞膜中糖蛋白合成过程中的重要活性成分，参与生物体内多种代谢，生物活性十分广泛。聚戊烯醇是生物体细胞膜糖蛋白生物合成的关键产物，以游离态醇或磷酸酯形式分布于细胞膜中，并能够参与生物体内多种生理代谢活动，因此聚戊烯醇可作为良好的药物运输载体。利用聚戊烯醇作为良好的生物细胞膜载体将药物送入细胞内部参与代谢，可以较好的提高药物的生物利用度以及靶向性，从而达到减少药物使用量和副作用的目的。

前期研究充分说明聚戊烯醇具有一定的抗菌、抗癌药物的活性增效作用，因此将聚戊烯醇开发成药物增效剂有着良好的应用前景。聚戊烯醇具有强疏水性，难溶于水，在人体和动物体内的生物利用度较低，更影响其生物活性研究以及相关制剂开发。因此，通过纳米制剂技术将聚戊烯醇进行有效包埋或分散，是解决相关制剂及其生物利用度问题的关键。壳聚糖是天然多糖中的阳离子碱性氨基多糖，生物相容性好，无毒，无抗原性，可生物降解，可包封不同极性的化合物，是一种优良的药物载体。壳聚糖与脂溶性成分如不饱和脂肪酸、胆固醇等是以氢键相互作用，具有良好的生物相容性和稳定性。壳聚糖的氨基阳离子与三聚磷酸钠的磷酸基阴离子通过静电吸引进行分子内或分子间交联，可进一步形成负载脂溶性成分的壳聚糖-三聚磷酸钠纳米载体。叶酸是维生素B₁₁，可作为酶来合成DNA，机体生长和繁殖都需要叶酸，是一碳单位转移酶的重要辅酶。叶酸没有毒害、比较稳定、免疫原性弱，可特异性地与细胞表面的叶酸受体作用形成复合物，其两者结合力非常强，对肿瘤有高度选择性，因此叶酸常被用来作为肿瘤靶向药物的修饰化合物。C₆₀富勒烯是一种单质碳中第三种被发现的同素异形体，具有笼型结构，拥有60个P轨道，其构成的大π键可形成一种共轭体系，使得它具有受电子和给电子的能力。C₆₀富勒烯由于其优异的强抗氧化性、自由基捕捉、光吸收、超导半导体、完美结构、DNA亲和、电子受体、高效吸附、内嵌分子等特性，已经被广泛应用到日用化妆品、医药中间体、保健品、橡胶/薄膜材料改性剂、高新能源、复合材料添加剂等诸多领域。氧化石墨烯是一般是通过氧化石墨制备所得，即在石墨烯分子上引入羧基、羟基、环氧基等含氧基团，可以分散在水和其它亲水性溶剂中，具有良好的生物相容性和可功能化特点，可实现对药物的有序吸附和释放作用。

本发明采用超声辅助乳化等方法，首先制备了负载聚戊烯醇和富勒烯的水包油型纳米乳液，即以聚戊烯醇和富勒烯为基础活性物的纳米乳液。基于上述纳米乳液为介质，利用叶酸偶联壳聚糖和氧化石墨烯，并采用离子交联法制备了负载聚戊烯醇和富勒烯的纳米复合物，即壳聚糖-氧化石墨烯负载聚戊烯醇-富勒烯的纳米复合物，满足了聚戊烯醇的亲水制剂要求，从而达到提高生物利用度、增加生物活性等目的。

发明内容

为实现上述目的，发明了一种壳聚糖-氧化石墨烯负载聚戊烯醇-富勒烯的纳米复合物的制备方法，本发明解决技术问题所采用的技术方案如下。

制作上述壳聚糖-氧化石墨烯负载聚戊烯醇-富勒烯的纳米复合物的方法，其工艺步骤是：