[发明专利]一种基于顶空气相色谱法的β-石竹烯含量测定方法

说明书

本发明公开了一种基于顶空气相色谱法的β‑石竹烯含量测定方法，其原理为从样本中首先提取β‑石竹烯，然后在顶空进样器中注入β‑石竹烯，当达到气液平衡时抽取上层气体，利用气相色谱分离，氢火焰离子检测器检测β‑石竹烯的浓度，最后以此计算出β‑石竹烯的含量。本发明所采用的顶空气相色谱法精密度高，可以检测到ppm级别的含量，检测灵敏度高。本发明的检测方法样本前处理过程简单易操作。本发明的检测方法的测定步骤都是仪器自动化操作，可以连续检测上百样品，读取准确数据，每一个样品测试时间短。本发明的检测方法相对于已有的气相色谱‑质谱联用法和毛细管气相色谱法，价格优势明显，且所需试剂无毒无害，绿色环保。

技术领域

本发明属于生命科学领域，具体涉及一种基于顶空气相色谱法的β-石竹烯含量测定方法。

背景技术

香气是风味品质的重要组成部分，许多植物和果实都具有香气。随着市场对果实品质的要求越来越高以及食品业、化妆品业对天然香味物质需求的增加，研究植物（包括水果）香气物质已成为一门新兴的学科。挥发性物质是香气的主要来源，伴随着植物（包括水果）的成熟，其挥发性物质的种类和含量都会产生一定的变化。

β-石竹烯主要用于配制精仿制品和定香剂，属于天然等同香料和人造香料，可由丁香叶油、丁香茎油、肉桂叶油等中分离而得，同时，β-石竹烯具有抗癌、抗高血压以及消炎镇痛等功。目前文献中已有的检测β-石竹烯含量的方法主要有毛细管气相色谱法和气相色谱-质谱联用法。

毛细管气相色谱法一来提取过程复杂，提取液多是有机溶剂；二来需要加入内标物；三来灵敏度和检测限都有待继续提高。气相色谱-质谱联用法价格昂贵，且对环境、试剂、仪器设备等要求很高。随着色谱技术近些年的飞速发展，在香气类物质的检测中应用也越来越广泛。但是现在市面上基于气相色谱法的检测技术，对于样品的前处理普遍繁琐。

顶空气相色谱法（HS-GC）又称液上气相色谱分析，是一种联合操作技术，通常采用进样针在一定条件下一定温度下对固体、液体、气体等进行萃取吸附，然后在气相色谱分析仪上进行脱附注射。顶空色谱技术以其简单实用的优点在环境检测（如饮用水中挥发性卤代烃和工业污水中挥发性有机物）、药物中有机残留溶剂检测、食品、法庭科学、石油化工、包装材料、涂料及酿酒业分析等领域得到广泛的应用。

发明内容

为了满足上述需求，本发明旨在提供一种基于顶空气相色谱法的β-石竹烯含量测定方法，具有检测精密高，灵敏度高，样本前处理便捷，连续性好，检测速度快，成本较低，环保无毒等优点。

为实现上述技术目的，达到上述技术效果，本发明通过以下技术方案实现：

一种基于顶空气相色谱法的β-石竹烯含量测定试剂盒，包括以下试剂：

试剂一，超纯水10mL×1瓶，4℃保存；

试剂二，β-石竹烯准品0.1mL×1支，-20℃保存。

一种基于顶空气相色谱法的β-石竹烯含量测定方法，其原理为在顶空进样器中注入β-石竹烯，当达到气液平衡时抽取上层气体，利用气相色谱分离，氢火焰离子检测器检测β-石竹烯的浓度，以此计算出β-石竹烯的含量。

本发明首次利用顶空气相色谱法来检测β-石竹烯的含量，其具体步骤如下：

步骤1 仪器和用品的准备；

准备气相色谱仪，30m KB-624柱子，氢火焰离子检测器，顶空进样器，20mL带垫片玻璃容器（50个），超纯水，β-石竹烯准品；

步骤2 β-石竹烯的提取；

组织样本：称取0.5g组织样本，并记录质量，磨碎，放入20mL带垫片玻璃容器中，加入2mL超纯水，塞好橡皮塞，在顶空进样器上达到气液平衡，在平衡一定时间后，取上层气体，注入气相色谱检测；