[发明专利]一种嗜酸乳杆菌代谢产物中乳酸和乙酸的分析方法在审
申请号: | 201811607983.X | 申请日: | 2018-12-27 |
公开(公告)号: | CN109781873A | 公开(公告)日: | 2019-05-21 |
发明(设计)人: | 关水;孙长凯;许建强;魏佳旭;刘璐 | 申请(专利权)人: | 大连理工大学 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02 |
代理公司: | 大连格智知识产权代理有限公司 21238 | 代理人: | 刘琦 |
地址: | 116024 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 乳酸和乙酸 嗜酸乳杆菌 代谢产物 色谱条件 检测 高效液相色谱法定量测定 细菌 相对标准偏差 优化培养条件 磷酸二氢钠 缓冲溶液 生长状况 培养基 进样量 流动相 有机酸 波长 柱温 回收率 灵敏 分析 参考 分类 优化 | ||
1.一种嗜酸乳杆菌代谢产物中乳酸和乙酸的分析方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1、MRS粉末溶于蒸馏水中,121℃高压灭菌15-20min,制成MRS液体培养基;
S2、将复苏活化后的嗜酸乳杆菌在OD600=0.9的条件下,以3%体积比接种到100mL上述MRS液体培养基中,37℃静置培养30h;
S3、将培养液以8000r/min的转速高速离心5min,获取上清液,用0.22μm孔径过滤器过滤2次,然后将上清液稀释10倍,存于样品瓶中,4℃保存备用;
S5、比较0.01mol/L的NaH2PO4和KH2PO4两种溶液作为流动相时,乳酸和乙酸的分离情况;
S6、比较流动相溶液浓度分别为0.01mol/L,0.02mol/L,0.03mol/L时,对乳酸和乙酸的出峰顺序和分离效果的影响;
S6、色谱条件为:流动相为0.01mol/L磷酸二氢钠缓冲溶液,流速1mL/min,柱温30℃,用C18色谱柱分离,检测波长为215nm,检测时间10min,进样量10μL。
2.根据权利要求1所述嗜酸乳杆菌代谢产物中乳酸和乙酸的分析方法,其特征在于,步骤S6中C18色谱柱参数情况为250mm×4.6mm,5μm。
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