[发明专利]一种嗜酸乳杆菌代谢产物中乳酸和乙酸的分析方法在审
| 申请号： | 201811607983.X | 申请日： | 2018-12-27 |
| 公开（公告）号： | CN109781873A | 公开（公告）日： | 2019-05-21 |
| 发明（设计）人： | 关水;孙长凯;许建强;魏佳旭;刘璐 | 申请（专利权）人： | 大连理工大学 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02 |
| 代理公司： | 大连格智知识产权代理有限公司 21238 | 代理人： | 刘琦 |
| 地址： | 116024 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 乳酸和乙酸 嗜酸乳杆菌 代谢产物 色谱条件 检测 高效液相色谱法定量测定 细菌 相对标准偏差 优化培养条件 磷酸二氢钠 缓冲溶液 生长状况 培养基 进样量 流动相 有机酸 波长 柱温 回收率 灵敏 分析 参考 分类 优化 | ||
【权利要求书】：
1.一种嗜酸乳杆菌代谢产物中乳酸和乙酸的分析方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、MRS粉末溶于蒸馏水中，121℃高压灭菌15-20min，制成MRS液体培养基；
S2、将复苏活化后的嗜酸乳杆菌在OD600＝0.9的条件下，以3％体积比接种到100mL上述MRS液体培养基中，37℃静置培养30h；
S3、将培养液以8000r/min的转速高速离心5min，获取上清液，用0.22μm孔径过滤器过滤2次，然后将上清液稀释10倍，存于样品瓶中，4℃保存备用；
S5、比较0.01mol/L的NaH2PO4和KH2PO4两种溶液作为流动相时，乳酸和乙酸的分离情况；
S6、比较流动相溶液浓度分别为0.01mol/L,0.02mol/L,0.03mol/L时，对乳酸和乙酸的出峰顺序和分离效果的影响；
S6、色谱条件为：流动相为0.01mol/L磷酸二氢钠缓冲溶液，流速1mL/min，柱温30℃，用C18色谱柱分离，检测波长为215nm，检测时间10min，进样量10μL。
2.根据权利要求1所述嗜酸乳杆菌代谢产物中乳酸和乙酸的分析方法，其特征在于，步骤S6中C18色谱柱参数情况为250mm×4.6mm，5μm。
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