[发明专利]一种真菌杀虫剂母药及其充氮常温贮藏方法

说明书

一种真菌杀虫剂母药及其充氮常温贮藏方法，属于生物技术领域。其特征在于将真菌杀虫剂母药或其产品置于封闭的包装袋或容器中，再在包装袋或容器中注入惰性氮气，常温贮存即可。上述一种真菌杀虫剂母药及其充氮常温贮藏方法和贮存期间孢子活力检测方法，其优点在于利用廉价氮气的惰性，强化真菌孢子在包装袋或容器内的休眠状态，延缓其活力的衰变，在常温下贮藏可获得低温冷贮的同样效果，具有操作简便、节能降耗、延长货架期及方便农户的特点，因而具有独特的技术创新性和应用前景。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体为一种真菌杀虫剂母药及其充氮常温贮藏方法。

背景技术

基于白僵菌（Beauveria）、绿僵菌（Metarhizium）等昆虫病原真菌的真菌杀虫剂有效成份即母药一般是具有完整细胞结构的侵染体，如固体发酵生产的分生孢子是最常见真菌杀虫剂母药。在生产过程中，企业需要建冷库贮存不断生产的孢子粉，出厂时配制成可湿性粉剂等剂型进入销售和使用渠道。干燥孢子粉在4～6℃冷库中低温贮存的有效期限一般要求达到一年以上，期间冷库耗电量较大，由此升高真菌杀虫剂的生产成本。干燥的真菌孢子粉虽然处于休眠状态，但仍维持低水平的生命活动，环境温度越高生命活动越旺盛，消耗细胞能量越多，其活力也下降越快，从而影响真菌杀虫剂产品的质量和杀虫效果。常温下贮存孢子粉母药一般在三个月后活孢率开始快速下降，故生产企业一般必须建冷库消耗电能才能延长母药的贮藏期。此外，基于孢子粉母药而配制的粉剂类产品，一般采不透光材料袋装或罐装，不仅运输和销售过程中需要低温冷贮，到农户手中若不及时使用也需要低温冷贮，才能保证产品的活力和杀虫效果。这在一定程度上成为真菌杀虫剂推广应用的限制性因素。

发明内容

针对现有技术中存在的上述问题，本发明的目的在于设计提供一种真菌杀虫剂母药及其充氮常温贮藏方法的技术方案，其将惰性氮气注入装有真菌杀虫剂孢子粉母药或粉剂类产品的密封袋或容器，尽可能减缓和降低孢子的生命活动，在常温下贮藏即可获得低温冷贮的同样效果，贮藏过程中不耗费电能，可有效降低真菌杀虫剂的企业生产成本，并方便农户使用。

所述的一种真菌杀虫剂母药，其特征在于采用以下方法制备：将灭菌和适度熟化的稻米、脱皮大麦或小麦物料与生产菌株的菌丝培养液或孢子粉按比例混匀接种，生物量与物料之比不超过0.5%，装入固相发酵装置，在23-27℃下培养至充分产孢，发酵的物料干燥后，用机械装置分离获得孢子粉，再真空干燥至含水量不超过5%，即为高纯度分生孢子粉即真菌杀虫剂母药。

所述的一种真菌杀虫剂母药，其特征在于所述的菌丝培养液采用以下方法制备：将保存在-75～-85℃超低温冰箱的孢子粉与石英砂混合物均匀涂抹接种于萨氏培养基平板上，在23-27℃和光周期11-13:11-13小时条件下活化培养至充分产孢，所获孢子粉悬于不含琼脂的萨氏培养液中，小三角瓶摇床振荡140-160 r/min，培养3天，再逐级扩大液体培养，以获得足够的菌丝培养液，干菌丝生物量约为1～1.2克/升。

所述的一种真菌杀虫剂母药，其特征在于具体的制备方法包括：

1）固相产孢发酵：将普通粳米在0.3%次绿酸纳液中浸泡3～5小时，清水淘洗后在灭菌锅中正常灭菌，使其熟化程度达到六成左右；自然冷却时，将适度熟化的稻米与菌丝培养液按9-11%的重量体积比混合，搅拌均匀的接种物料平摊在透光立式多层产孢培养箱的各物料盘中，调节室温在23-27℃，固体发酵8～10天至充分产孢；

2）孢子粉收获与干燥：将上述发酵物料在29-33℃通风烘箱中干燥过夜，然后用MH-V型真菌孢子分离器从风干物料上收获孢子粉，所获孢子粉进一步常温真空干燥13-25小时，即得含水量不超过5%的高纯度分生孢子粉即真菌杀虫剂母药。

所述的一种真菌杀虫剂母药的充氮常温贮藏方法，其特征在于将真菌杀虫剂母药或其产品置于封闭的包装袋或容器中，再在包装袋或容器中注入惰性氮气，常温贮存即可。