[发明专利]假单胞菌及该菌修复铬污染土壤的微生物原位固化方法

说明书

本发明提供一种假单胞菌，分类命名为：Pseudomonas sp GRINML7，保藏单位为：中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉武汉大学，保藏日期为：2018年10月15日，保藏编号为：CCTCC NO：M2018674。利用该菌处理铬污染土壤，可以在中性及偏碱性pH下将六价铬离子还原为三价铬；在适宜的pH下，该菌可在好氧条件下，将六价铬离子转化为三价铬离子生成氢氧化铬沉淀，有效还原固化六价铬离子，且绿色环保无二次污染等特点，为铬污染土壤微生物还原固化修复提供可操作工艺。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，涉及一种假单胞菌(Pseudomonas sp)属细菌、其培养方法以及利用该菌修复铬污染土壤微生物还原固化的过程。

背景技术

在铬盐(以重铬酸钠计)生产过程中会产生含铬废渣，这些废渣因数量大、污染重、治理难度大而备受关注。我国多数铬盐厂由于管理不善、设备老化、车间跑冒滴漏现象严重，造成了大量含铬“三废”经过长期风吹雨淋进入周围环境，导致厂区周围土壤严重污染。国内仅有数个规模较小的铬污染场地开展了相应的治理工作。其中修复铬污染土壤最重要是还原固化六价铬离子为三价氢氧化铬沉淀。铬污染土壤的修复方法主要有化学法和生物法，目前开展的研究中普遍采用化学还原法，主要利用铁屑、硫酸亚铁、硫化物或其他一些容易得到的化学还原剂(也可以辅以一定的粘合剂)将六价铬还原为三价铬，形成难溶的化合物，从而降低铬在环境中的迁移性和生物可利用性，减轻铬污染的危害。化学还原法修复铬污染土壤的示范工程已在华盛顿州Frontier Hard Chrome公司完成，该方法已经在实际工程中得到应用。然而向土壤中投加的还原剂易造成土壤的二次污染，且化学还原法处理后生成的三价铬易被氧化为六价铬，因此如何保证六价铬长效还原固定是该技术的难点。

发明内容

本发明的第一个目的是提供一株高效的假单胞菌，该菌种可有效还原固化六价铬离子，并在适宜的pH下，还原六价铬离子形成氢氧化铬沉淀。

本发明的第二个目的是提供一种可以富集、分离、培养该细菌的培养基。

本发明的第三个目的是提供一种利用该菌修复铬污染土壤微生物原位固化的方法。

为了实现上述目的，本发明提供一株假单胞菌，该菌分类命名为：Pseudomonas spGRINML7，保藏单位为：中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉武汉大学，保藏日期为：2018年10月15日，保藏编号为：CCTCC NO：M2018674。

该假单胞菌可以在高pH下可有效还原固化六价铬离子；在pH为偏碱性时，该菌可将六价铬离子形成氢氧化铬沉淀。

本发明还提供用于分离培养如上述假单胞菌的培养基(简称：分离培养基)，该培养基配方为：蛋白胨1.2g/L，乳酸钠1mL/L，KH₂PO₄ 3g/L，K₂HPO₄ 4g/L，MgSO₄·7H₂O 0.02g/L，K₂Cr₂O₇ 1000mg/L，微量元素母液0.1mL/L；调pH为8，1000mL蒸馏水、琼脂粉20g/L；其中，微量元素母液配方为：H₃BO₃ 6g/L，CoCl₂·6H₂O 4g/L，ZnSO₄·7H₂O 2g/L，MnCl₂·4H₂O0.6g/L，Na₂MoO₄·7H₂O 0.6g/L，NiCl₂·6H₂O 0.4g/L，CuCl₂·2H₂O 0.2g/L。

配制时将琼脂粉以外的成分混合均匀后加入琼脂粉，调pH为8，121℃下灭菌30分钟，然后倒平板。