[发明专利]一种人类免疫缺陷病毒1型核酸定量检测试剂盒

说明书

本发明提供了一种人类免疫缺陷病毒1型核酸定量检测试剂盒，具体地，本发明利用实时荧光聚合酶链式反应技术对HIV‑1 RNA核酸鉴别并且进行定量的检测试剂盒，可广泛应用于HIV病毒引起的艾滋病的窗口期检测、临床诊断、科学研究、疗效跟踪，以及检验检疫和疫情防控等多个领域。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明涉及一种人类免疫缺陷病毒1 型(HIV-1)核酸定量检测试剂盒。

背景技术

人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus；HIV)，即艾滋病 (AIDS，获得性免疫缺陷综合征)病毒，它是一种感染人类免疫系统细胞的慢病毒(Lentivirus)，属逆转录病毒的一种。1981年，人类免疫缺陷病毒在美国首次发现。因为HIV病毒直接攻击的是人体CD4-T淋巴细胞系统，免疫系统被不可逆转的破坏，病毒一旦侵入机体细胞，就和人体细胞整合到一起终生难以消除。艾滋病人随后感染其他各种疾病后无法治愈，并可发生恶性肿瘤，病死率极高。2017年10月27日，世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单初步整理参考，人类免疫缺陷病毒I型(感染)在一类致癌物清单中。

艾滋病在感染后可具有较长的无症状潜伏期，在潜伏期期间HIV感染者通过性接触、血液接触、母婴传播进一步感染健康人群，给社会带来极大的卫生安全威胁。2011年全球新增艾滋病病毒感染者250万，HIV感染相关的死亡人数约为170万。HIV感染的整体防治形式依然非常严峻，高质量、高性价比的HIV检测初筛试剂有着极大的市场需求。控制艾滋病流行的关键，还是加强对人群HIV筛查、早期诊断和疫情遏制，因此高灵敏度，窗口期短的HIV检测方法对控制HIV传播有重大意义。

艾滋病病人样本具有极端生物危害风险；只有在最高级别的生物防护条件下才可进行检测。艾滋病病毒感染可通过若干类型的实验室检测获得明确诊断，如：抗体捕获酶联免疫吸附试验(ELISA)、抗原检测试验、血清中和试验、Real time RT-PCR检测和病毒分离培养。

血清学中和试验、病毒分离培养具有安全风险高、灵敏度低、免疫交叉反应以及周期长等缺点，并不适用于要求快速高通量的人群初筛。抗原抗体检测方法，灵敏度较好，反应迅速，明显的缺点是艾滋病感染初期会有1-3个月的“窗口期”，这期间病人血清中没有足量的抗体产生反应，抗原抗体检测结果呈阴性或不确定性，不利于艾滋病病毒感染的早期诊断，造成漏检，可能导致HIV传播风险；艾滋病末期抗体也明显下降，不利于检测跟踪。普通PCR灵敏度较低，HIV变异度非常高，流行的亚型非常多，检出效果不理想。

因此，本领域迫切需要开发能够高灵敏度，窗口期短HIV检测方法以满足临床需求。

发明内容

本发明的目的在于提供一种高灵敏度、使用便捷的人类免疫缺陷病毒1型 (HIV-1)核酸定量检测试剂盒。

本发明的第一方面，提供了一种用于检测人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1) 的PCR引物对组，所述引物对组包括第一引物对，所述第一引物对包括如SEQ ID NO.:1所示的正向引物；和，如SEQ ID NO.:2所示的反向引物。

在另一优选例中，所述引物对组还包括第二引物对，所述第二引物对包括如SEQID NO.:4所示的正向引物；如SEQ ID NO.:5所示的正向引物；和，如 SEQ ID NO.:6所示的反向引物。

本发明的第二方面，提供了一种用于检测人类免疫缺陷病毒1型的探针组，所述探针组包括：如SEQ ID NO.:3所示的针对LTR基因保守序列的特异性的探针。

在另一优选例中，所述探针组还包括：如SEQ ID NO.:7所示的针对GAG 基因保守序列的特异性的探针。

本发明的第三方面，提供了一种用于检测人类免疫缺陷病毒1型的试剂盒，所述试剂盒包括HIV-1反应液A，所述HIV-1反应液A包括本发明第一方面所述的PCR引物对组。