[发明专利]一种用于检测三聚氰胺含量的方法及其专用胶体金试纸

说明书

本发明公开了一种用于检测三聚氰胺含量的方法及其专用胶体金试纸。该胶体金试纸中，猝灭抗体结合垫上包被有三聚氰胺抗体标记的胶体金，反应膜上的质控线位置包被所述三聚氰胺抗体的抗体，检测线位置包被所述三聚氰胺抗体的抗原，背板上涂布荧光物质；所述三聚氰胺抗体为以式(I)所示的化合物与载体蛋白的偶联物作为免疫原制备的抗体。实验证明，使用本发明所提供的胶体金试纸可以快速检测奶样中三聚氰胺的含量，操作简单，耗时短，准确率高，且灵敏度高，最小检出限可达5μg/L。本发明所提供的胶体金试纸在快速检测三聚氰胺含量中具有重要的应用价值。

技术领域

本发明属于食品安全检测技术领域，具体涉及一种用于检测三聚氰胺含量的方法及其专用胶体金试纸。

背景技术

三聚氰胺，是一种三嗪类含氮杂环有机化合物，重要的氮杂环有机化工原料，简称三胺，俗称蜜胺或蛋白精，分子式为C₃N₆H₆，分子量为126.12。由于三聚氰胺的分子式中含氮量为66％左右，而蛋白质的平均含氮量为16％左右，因此，由于乳品工业蛋白质含量测试方法的缺陷，三聚氰胺常被不法商人用作食品添加剂，以提升食品检测中的蛋白质含量指标。虽然三聚氰胺的毒性比较低微，但长期摄入仍不容忽视。1994年国际化学品安全规划署和欧洲联盟委员会合编的《国际化学品安全手册》第三卷和国际化学品安全卡片说明，长期或反复大量摄入三聚氰胺可能对肾与膀胱产生影响，导致产生结石。

目前，乳品中三聚氰胺残留的检测方法主要采用仪器分析法和免疫分析法。仪器分析法包括高效液相色谱(HPLC)法、气质联用(GC-MS)法和液质联用(LC-MS/MS)法。HPLC法具有定量准确等优点，但在检测时前处理相对复杂，在实际应用中存在方法灵敏度低等缺点。GC-MS法可进行确证检测且灵敏度高，但前处理过程复杂，需进行衍生化处理。LC-MS/MS法具有灵敏度高、选择性好、定性定量准确、抗干扰能力强等优点，但该方法也存在前处理过程复杂，耗时比较长、成本高等缺点。免疫分析法包括酶联免疫吸附分析法和胶体金免疫层析法，具有快速方便、操作简单、成本较低、筛检样品效率高的优点，但是酶联免疫吸附法所用抗体与酶均属生物活性物质，需要低温保存，稳定性差；胶体金免疫层析法检测灵敏度低，主要用于快速筛选分析，且酶联免疫吸附分析法和胶体金免疫层析法均存在非特异性反应，检测结果易出现假阳性的问题。因此，急需制定既简便快速、又能准确定量的检测方法来改善现状，填补原有的快速检测方法的缺失，提升并规范整个快检行业的技术水平及产品质量。

发明内容

本发明的目的是快速检测待测溶液中的三聚氰胺含量。

本发明首先保护一种用于检测三聚氰胺含量的胶体金试纸，其猝灭抗体结合垫上包被有三聚氰胺抗体标记的胶体金，反应膜上的质控线位置包被所述三聚氰胺抗体的抗体，检测线位置包被所述三聚氰胺抗体的抗原，背板上或反应膜下喷涂荧光物质；

所述三聚氰胺抗体为以式(I)所示的化合物与载体蛋白的偶联物作为免疫原制备的抗体；

上述胶体金试纸中，所述三聚氰胺抗体可为a1)或a2)：

a1)式(I)所示的化合物与载体蛋白的偶联物作为免疫原免疫动物后经体细胞杂交获得的三聚氰胺单克隆抗体；

a2)式(I)所示的化合物与载体蛋白的偶联物作为免疫原对动物加强免疫所获得的三聚氰胺多克隆抗体。

所述动物可为小鼠、兔、山羊、绵羊或马中的任一种。

上述胶体金试纸中，所述三聚氰胺单克隆抗体由重链和轻链组成。所述重链的可变区的氨基酸序列可如序列表的序列1所示。所述轻链的可变区的氨基酸序列可如序列表的序列2所示。

上述胶体金试纸中，所述三聚氰胺抗体的抗体可为羊抗鼠的IgG抗体。所述羊抗鼠的IgG抗体具体可为美国Jackson ImmunoResearch公司的产品。