[发明专利]利用花培单倍体培育芦竹的方法

说明书

本发明公开了利用花培单倍体培育芦竹的方法，方法步骤如下：S1：将抗逆性好、植株大的芦竹上处于单核靠边期的花芽取下，然后进行消毒处理，将消毒处理后的花芽在解剖镜下取出花药；S2：将S1所得花药接种在愈伤组织培养基上进行愈伤组织诱导培养；S3：将S2培养获得的芦竹愈伤组织接种于不定芽分化培养基上进行分化培育，获得芦竹不定芽；S4：将S3所得的芦竹不定芽接种于生根培养基上进行生根培养；S5：经过倍性鉴定，获得芦竹单倍体植株。本发明提高了芦竹的抗逆性,缩短了芦竹的培育周期。

技术领域

本发明涉及芦竹培育技术领域，尤其涉及利用花培单倍体培育芦竹的方法。

背景技术

芦竹(Arundodonax)禾本科、芦竹属多年生植物，具发达根状茎，秆粗大直立、坚韧，具多数节，常生分枝，可用于饲料、乙醇、造纸、发电和环境修复等多种行业。

现有芦竹繁殖有播种、分株、扦插等方法，一般以分株方法为主；通常是早春时用快揪沿植物四周切成有4-5个芽一丛，然后移植；这种方法繁殖速度慢、种苗易带毒，且劳动强度大、运输不便，造林成本高，难以在短时间内解决种苗供应紧缺的问题，不利于芦竹的产业化生产。相对于传统的方法，利用组培技术对芦竹进行繁殖，能够短时间内获得大量整齐一致的无病毒种苗，种苗生长优势明显，是芦竹种苗产业化繁育的一种有效途径。

多倍体育种是植物新品种培育的重要手段，多倍体育种起源于20世纪初，现在已广泛应用于植物新品种的培育中。多倍体由于基因组倍性的增加，往往表现出形态上的巨大性和抗性增强等特点。其中三倍体还具有不育特点，即可作为永久杂种，也有利于商业保护；通过基因组三倍化，可以获得具有多倍体和杂交种双重优势的三倍体，其优势表现出具有巨大性和不可替代性。

发明内容

基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了利用花培单倍体培育芦竹的方法，提高了芦竹的抗逆性,缩短了芦竹的培育周期。

本发明提出的利用花培单倍体培育芦竹的方法，方法步骤如下：

S1：将抗逆性好、植株大的芦竹上处于单核靠边期的花芽取下，然后进行消毒处理，将消毒处理后的花芽在解剖镜下取出花药；

S2：将S1所得花药接种在愈伤组织培养基上进行愈伤组织诱导培养，所述愈伤组织培养基的配方为1/2MS+NAA 0.1-0.15mg/L+蔗糖6-8g/L+椰乳5-10g/L+萘乙酸0.05-0.1mg/L+6-BA(2-4mg/L)；

S3：将S2培养获得的芦竹愈伤组织接种于不定芽分化培养基上进行分化培育，获得芦竹不定芽，所述分化培养基的配方为1/2MS+NAA 0.1-0.15mg/L+CPPU(0.8-1.2mg/L)+椰乳5-10g/L+6-BA(0.1-0.15mg/L)+萘乙酸0.05-0.1mg/L+2、4-D(1-3mg/L)+蔗糖6-8g/L；

S4：将S3所得的芦竹不定芽接种于生根培养基上进行生根培养，所述生根培养基的配方为：MS+NAA 0.1-0.15mg/L+蔗糖6-8g/L+椰乳5-10g/L+萘乙酸0.05-0.1mg/L+海泡石0.5-1.5g/L+活性炭0.8-2.0g/L；

S5：经过倍性鉴定，获得芦竹单倍体植株。

优选地，所述S1中的消毒处理方法为：首先对取下的花芽用无菌水冲洗，然后再用酒精浸泡20-40min，然后再用次氯酸钠对花芽进行表面灭菌，最后再用无菌水冲洗，并喜感花芽表面的水分。

优选地，所述S2中愈伤组织的培养条件为：黑暗条件，温度25±2℃。

优选地，所述S3中分化培养的条件为：培养温度25±2℃，光照时间为10-14h/d，光照强度2000-3000Lux，色温4500-5500k。