[发明专利]同时检测多种心肌标志物的化学发光微阵列芯片及试剂盒

说明书

本发明公开了一种同时检测多种心肌标志物的化学发光微阵列芯片及试剂盒。所述的化学发光微阵列芯片的反应区内包含一组由检测目标物的捕获抗体固定在芯片载体上组成的矩阵阵列，检测目标物为多种心肌标志物。试剂盒包括化学发光微阵列芯片、标记有辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶的第二抗体溶液、对标记物敏感的化学发光底物、检测目标物标准溶液。利用上述生物芯片或者试剂盒同时检测多种心肌标志物，可弥补现阶段心肌标志物同时定量检测技术的空白，满足在紧急情况下对心肌标志物同时进行快速检测的要求，具有多靶标、成本低、自动化程度高、灵敏度高、检测时间短和操作简单易行等特点。

技术领域

本发明属于POCT检测技术领域，涉及一种生物芯片，特别涉及一种同时检测多种心肌标志物的化学发光微阵列芯片及试剂盒。

背景技术

心血管疾病是危害人类健康及生命的严重疾病，已成为21世纪人类健康的头号杀手。其中，急性心肌梗死最常见、最危险。个人行为方式和生活习惯的转变，使中国人发生心血管疾病的风险迅速赶超美国等发达国家。

心血管检验是整个心血管领域中的“瓶颈”学科，因为只有在尽可能短的时间内正确诊断疾病，才能早发现、早治疗，最大程度防止致残、致死后果，改善患者预后和生活质量。近年来，对于心血管生物标志物的研究日益深入，积累了大量临床经验和证据，逐步明确了它们的临床适应症和新的研究领域，推动了他们的临床应用。生物标记物的检测可直接影响心血管疾病患者的临床诊断、危险分层、治疗方案选择和预后判断。心脏标志物全称为心脏损伤早期标志物，是指心脏损伤后6小时内血中水平升高的标志物，是临床中诊断心肌梗死、心肌缺血、心衰等心脏疾病的重要检测指标，主要包括心肌肌钙蛋白I(cTnⅠ)、肌红蛋白(MYO)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、D-二聚体(D-Dimer)和N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)等。随着科技不断发展，血液中的心衰标志物检测被逐步应用于临床，给心血管疾病的早期诊断、预后转归提供了方法。

心肌肌钙蛋白I(cTNI)在健康人的血清或血浆中浓度极低，检测不到，患者胸痛发作后4-8小时，坏死的心肌细胞大量释放cTNI进入血液循环系统，12-48小时达峰值，严重心梗病人数天后cTNI仍然维持在较高水平，是诊断心肌损伤和心肌梗死的最优标志物。

肌红蛋白(MYO)存在于心肌和骨骼肌中，体积小，心肌细胞坏死时能迅速扩散入血，1-2小时浓度就可升高，是急性心肌梗死的早期指标。心梗病人发病后24小时，MYO浓度可恢复正常，因此MYO可以用于诊断再发心肌梗死。

肌酸激酶同工酶(CK-MB)是WHO推荐的判断心肌梗死三个标准之一。CK-MB是肌酸激酶的三个二聚体同工酶之一，在心肌中比例较高，心肌细胞坏死时进入血液循环，心梗患者发病后3-4小时后浓度升高，18-24小时达峰，72小时内可恢复正常。

D-二聚体(D-Dimer)是检测血液的D-二聚体的含量变化可作为体内高凝状态和纤溶亢进的标志。急性心肌梗死及脑血栓形成时，患者急性发病时血浆D-二聚体水平明显增高，D-二聚体检测不仅可作为观察心肌梗死病情的一项指标，而且也是观察溶栓治疗的一种理想检测方法。

NT-proBNP是BNP激素原分裂后没有活性的N-末端片段，与BNP相比，半衰期更长，更稳定，其浓度可以反映短暂时间内新合成的而不是贮存的BNP释放，因此更能反映BNP通路的激活。血浆NT-proBNP水平随心衰程度加重而升高。在急性心衰的诊断中，NT-proBNP有着重要意义。

目前，以上标志物已经被医院广泛接受。也有多种单独检测上述指标的试剂盒面市。但是目前采取的主流方法是免疫单指标的测定方法(例如ELISA和化学发光法等)。虽然能够测定上述标志物，但是存在检测速度慢，检测成本高等缺点。

发明内容