[发明专利]抗人MYO抗体及其在检测试剂盒中的应用

说明书

本发明涉及新型的一种抗人MYO抗体及其在检测试剂盒中的应用，属于免疫化学领域。本发明制备了多种抗体，并进行配对筛选，获得灵敏度及特异性均能满足需求的抗体组合(M26及M08)；同时其方便大量生产，可满足日后大规模临床应用的需求。对上述抗体组合进行检测体系的调试优化工作，可完全满足制备人肌红蛋白的荧光快速检测试纸卡的应用需求，所述荧光快速检测试纸卡操作简便，灵敏度，特异性及相关检测性能均符合商业化应用指标。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体的涉及两种抗人肌红蛋白(MYO)抗体及其制备方法以及上述抗体在人肌红蛋白检测中的应用。

背景技术

肌红蛋白(MYO)是骨骼肌和心肌特异性氧结合蛋白。分子量为16.7KDa，由一条含有153个氨基酸残基的多肽链和一个血红素辅基构成，呈紧密球形。

由于肌红蛋白分子量小，当肌细胞受损时，肌红蛋白会释放至循环系统中，1～2小时升高，12小时达到峰值，24小时后逐渐下降，是早期诊断急性心肌梗塞等疾病的重要参考指标。

目前肌红蛋白的免疫检测方法主要有胶体金免疫层析法、酶联免疫测定法和化学发光免疫测定法等。胶体金免疫层析法具备操作简便、快捷、可单份检测、便于保存、不需要特殊设备等优点，但由于灵敏度不高，难以实现定量等缺点限制了这种方法的使用。酶联免疫测定法由于具备操作简单，试剂有效期长，无污染、高于胶体金的敏感性、特异性好、结果可用仪器测定等特点，但由于敏感性相对较低，所用标记酶与底物可定量测定范围窄及仪器测定范围窄等缺点，限制了其在微量免疫定量测定中的应用。化学发光免疫分析法虽具有准确、灵敏度高、特异性强、精密度好的优点，但其所用仪器价格昂贵，所用试剂又为进口试剂，一般实验室难以开展，并且不适用于急诊检验。因此，建立一种检测时间尽量短，并且除了能在实验室进行检测外，还能够进行床旁检测，同时能定量测定Myo的检测方法，从而为临床提供准确的诊断依据，是十分必要的。

为克服现有肌红蛋白(Myo)检测技术的不足，本发明提供了一种快速检测Myo的荧光定量试纸条及其制备方法与应用。本发明根据免疫荧光技术特点和Myo抗原抗体系统特点，设计新的原材料、试剂和工艺流程，应用本发明提供的试纸条检测Myo水平，具有简单、快速、灵敏和特异性好等特点,因此适用于检测精密度要求较高的检验中心或大型医院临床科室的应用需求。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供能有效的、特异性结合人肌红蛋白的抗体。更具体地说：

本发明的第一目的在于提供两种抗人肌红蛋白抗体。

第一种抗人肌红蛋白抗体(M26)，

其重链可变区含有以下的互补决定区：氨基酸序列如序列SEQ ID NO：1所示的HCDR1、如序列SEQ ID NO：2所示的HCDR2和如序列SEQ ID NO：3所示的HCDR3；

其轻链可变区序列含有以下的互补决定区：氨基酸序列如序列SEQ ID NO：4所示的LCDR1、如序列SEQ ID NO：5所示的LCDR2和如序列SEQ ID NO：6所示的LCDR3。

优选的是上述抗体(M26)的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示。

第二种抗人肌红蛋白抗体(M08)，

其重链可变区含有以下的互补决定区：氨基酸序列如序列SEQ ID NO：9所示的HCDR1、如序列SEQ ID NO：10所示的HCDR2和如序列SEQ ID NO：11所示的HCDR3；

其轻链可变区序列含有以下的互补决定区：氨基酸序列如序列SEQ ID NO：12所示的LCDR1、如序列SEQ ID NO：13所示的LCDR2和如序列SEQ ID NO：14所示的LCDR3。