[发明专利]一种抑制埃博拉病毒的核酸、含有该核酸的药物组合物及其用途

说明书

一种抑制埃博拉病毒基因表达的siRNA，该siRNA含有正义链和反义链，正义链包含核苷酸序列1，反义链包含核苷酸序列2，核苷酸序列1和核苷酸序列2至少部分地反向互补形成双链区。核苷酸序列1和核苷酸序列2的长度均为19个核苷酸，核苷酸序列2至少部分地与第一段核苷酸序列反向互补，所述第一段核苷酸序列为埃博拉病毒mRNA中与所述核苷酸序列2的长度相同的一段核苷酸序列。按照5'末端到3'末端的方向，核苷酸序列1的第7、8、9位的核苷酸为氟代修饰的核苷酸，核苷酸序列2的第2、6、14、16位的核苷酸为氟代修饰的核苷酸。该siRNA和含有该siRNA的药物组合物具有良好的抑制埃博拉病毒基因表达的活性。

技术领域

本公开涉及一种siRNA、含有该siRNA的药物组合物以及它们的用途。具体而言，本公开涉及一种用于抑制埃博拉病毒基因表达的siRNA、含有该siRNA作为活性成分的药物组合物、以及所述siRNA、药物组合物在制备用于预防和/或治疗埃博拉病毒病的药物中的应用。

背景技术

埃博拉病毒病是由纤丝病毒科(filoviridae)的埃博拉病毒(Ebola virus，EBOV)所引起的一种急性出血性传染病。主要通过患者的血液和排泄物传播，临床主要表现为急性起病发热，肌痛出血皮疹和肝肾功能损害。

EBOV属丝状病毒科丝状病毒属，为单股不分节段的负链RNA病毒；其分为四种亚型：扎伊尔埃博拉病毒(Zaire Ebola Virus，ZEBOV)，毒力最强，人感染后死亡率高达90％；苏丹埃博拉病毒(Sudan Ebola Virus，SEBOV)，感染后死亡率可达50％；科特迪瓦埃博拉病毒(Cote d'Ivoire Ebola Virus，CEBOV)和莱斯顿埃博拉病毒(Reston Ebola Virus，REBOV)对非人类灵长类动物具有致死性作用，对人类毒力较弱。

EBOV基因组是负链RNA，长度为18.9kb，含7个开放阅读框，其排列顺序为：3’-NP-VP35-VP40-GP-VP30-VP24-L-5’，每种产物均由各自单独的mRNA所编码。L蛋白和VP35共同组成聚合酶，完成Ebola RNA的复制。二者是理想的治疗靶点，其抑制可完全阻止RNA的合成，而且哺乳动物细胞内不存在这两种蛋白。VP24也可作为治疗靶点，因为其可抑制宿主的I型干扰素反应。

若能从基因水平沉默病毒的基因表达，阻断埃博拉病毒的生成和复制，由此从根本上降低病毒代谢和对细胞的侵染，无疑将是最为理想的埃博拉病毒病治疗手段。小干扰RNA(smallinterferingRNA，siRNA)可基于RNA干扰(RNAinterference，RNAi)这一机制，以序列特异性的方式抑制或阻断任何感兴趣的目的基因的表达，从而达到治疗疾病的目的。

前人已经对siRNA作为治疗埃博拉病毒病的药物活性成分进行了研究，然而，siRNA本身的稳定性较差，在体内容易被核酸酶降解(特别是，在体内系统给药后，siRNA首先会进入体内的血液循环系统，而血液中富含内源性核酸酶)。为克服这一障碍，其中一种手段便是对siRNA进行化学修饰，以提高siRNA在血液中的稳定性。迄今为止，本领域技术人员对siRNA进行了大量研究，可是，对siRNA在血液中的降解过程和机制仍缺乏足够了解，对修饰方式和修饰位点的选择依然是一个经验主义的、必须通过反复实验来验证的过程。

因此，对于具有不同核苷酸序列的siRNA，技术人员仍然需要具体分析该siRNA，找出适合于该siRNA序列的具体修饰方案，以开发出具有良好稳定性、良好生物活性或和细胞毒性较低的修饰的siRNA。

发明内容

本公开的目的是提供一种能够选择性和有效地抑制埃博拉病毒基因的表达的siRNA分子，以及包含所述siRNA作为活性成分的药物组合物，该药物组合物能够有效预防和/或治疗由埃博拉病毒感染引起的病理状况和疾病，如急性起病发热、肌痛出血皮疹和肝肾功能损害。

发明人发现，出人意料地，本公开提供的siRNA具有显著更高的埃博拉病毒基因抑制活性并显示出优异的血液稳定性。