[发明专利]一种快速筛选细胞微载体培养系统的方法

权利要求书

1.一种快速筛选细胞微载体培养系统的方法，包括如下步骤：

A、不同的微载体与不同的培养基混合接种细胞，得到微载体-细胞混合的培养基；

B、将微载体-细胞混合的培养基接种到琼脂糖铺板的培养板上，在细胞培养箱内静置3-12小时，然后以0-60rpm转速在细胞培养箱摇培，每日取样微载体，观察微载体上细胞贴壁增殖情况；每3天更换新鲜的培养基，培养细胞5-7天。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤B所述琼脂糖铺板具体为2％-50％的琼脂糖水溶液铺满培养板底部，冷却凝固。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤A所述微载体包括Cytodex-1、Cytodex-3、Solohill Plastic、Solohill Hellex。

4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，步骤A所述培养基包括α-MEM+10％FBS、DMEM+10％FBS、DMEM/F12+10％FBS、StemMSC SFM Xeno-Free。

5.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，步骤A所述细胞包括骨髓间充质干细胞、脐带间充质干细胞、脂肪间充质干细胞、牙髓间充质干细胞。

6.根据权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于，还包括统计培养后的细胞活力与细胞总数的步骤。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述统计培养后的细胞活力与细胞总数的步骤具体为收集微载体，胰酶消化微载体上的细胞，收集细胞沉淀，完全培养基重悬后，统计细胞活力与细胞总数。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述收集微载体具体为弃去培养上清，将微载体用PBS重悬后，转移至新的离心管中，用PBS清洗一次。

9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述胰酶消化微载体上的细胞具体为加入0.25％胰酶-EDTA，放置在37℃恒温摇床孵育15-30分钟。

10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述收集细胞沉淀具体为将消化后的混合液过70μm的细胞筛网，过滤掉微载体，滤液放置在新的离心管内，以1000-1500rpm离心5-10分钟，收集细胞沉淀。