[发明专利]以已结瓜的芋香冬瓜的芽为外植体的离体快繁技术

权利要求书

1.一种以已结瓜的芋香冬瓜的芽为外植体的离体快繁技术，其特征在于，包括如下步骤：

1)外植体的选取与处理：连续晴朗三天后的早晨，在大田中选取已结成熟商品瓜的芋香冬瓜苗的顶芽或腋芽作为外植体，将得到的外植体进行消毒处理；

2)丛生芽诱导培养：将消毒后的外植体接种于芽诱导培养基中进行丛生芽诱导培养，得到诱导培养的丛生芽，其中，培养条件为：光照强度1000-2000lx，光照时间16小时，培养温度27±1℃，空气相对湿度为75％-80％，培养23-26天；

3)丛生芽增殖：将诱导出的丛生芽接种到增殖培养基进行丛生芽增殖培养，得到增殖芽，其中，培养条件为：光照强度1000-2000lx，光照时间16小时，培养温度27±1℃，空气相对湿度为75％-80％，培养25-28天；

4)生根培养：将得到的高约1.5-2cm增殖芽从基部切下，转入生根培养基中进行诱导生根，得到不定根，其中，培养条件为：光照强度2000-3000lx，光照时间16小时，培养温度27±1℃，空气相对湿度为75％-80％，培养5-10天；

5)炼苗移栽：将芋香冬瓜瓶苗进行室外炼苗6-7天，然后洗去附着于苗根系上的培养基，移栽至小育苗杯中进行培养，得到组培苗；

6)大田培养：将组培苗移至大田进行常规栽培，将植株顶部打掉，让其萌发侧芽，长侧枝，促进坐果生长。

2.如权利要求1所述的以已结瓜的芋香冬瓜的芽为外植体的离体快繁技术，其特征在于，步骤1)所述的消毒步骤为：将外植体在流水下冲洗去除表面污垢后，切成带芽的节段；用质量百分比浓度为15-20％新洁尔灭浸泡带芽的芋香冬瓜节段，转入超净工作台上进行表面杀菌；将杀菌后的外植体经无菌水冲洗后，用质量百分比浓度75％的酒精浸泡后，再用无菌水冲洗，切去伤口部位，再用含有质量百分比浓度0.05-0.1％的HgCl2溶液消毒，无菌水冲洗，切去伤口部位后用无菌的过滤纸吸干表面水分。

3.如权利要求2所述的以已结瓜的芋香冬瓜的芽为外植体的离体快繁技术，其特征在于，步骤1)所述的消毒步骤为：将外植体在流水下冲洗10-20min去除表面污垢后，切成带芽的节段；用质量百分比浓度为15-20％新洁尔灭浸泡带芽的芋香冬瓜节段5-10min，转入超净工作台上进行表面杀菌；将杀菌后的外植体经无菌水冲洗3-5次后，用质量百分比浓度75％的酒精浸泡30-60s后，再用无菌水冲洗3-5次，切去伤口部位，再用含有质量百分比浓度0.05-0.1％的HgCl2溶液消毒7-10min，无菌水冲洗5-6次，切去伤口部位后用无菌的过滤纸吸干表面水分。

4.如权利要求1所述的以已结瓜的芋香冬瓜的芽为外植体的离体快繁技术，其特征在于，所述步骤1)中顶芽或腋芽选自刚刚有花芽。

5.如权利要求1所述的以已结瓜的芋香冬瓜的芽为外植体的离体快繁技术，其特征在于，步骤2)所述的芽诱导培养基为：MS,质量百分比浓度0.1-0.3mg/L的2-IP，质量百分比浓度30g/L蔗糖，质量百分比浓度6.0g/L琼脂，pH为5.8。

6.如权利要求1所述的以已结瓜的芋香冬瓜的芽为外植体的离体快繁技术，其特征在于，步骤3)所述的增殖培养基含有MS，质量百分比浓度0.05-0.2mg/L 2-IP，质量百分比浓度30g/L蔗糖，质量百分比浓度6.0g/L琼脂，pH为5.8。

7.如权利要求1所述的以已结瓜的芋香冬瓜的芽为外植体的离体快繁技术，其特征在于，步骤4)所述的生根培养基为：生根培养基含有MS，质量百分比浓度0.1-0.2mg/L IBA，质量百分比浓度30g/L蔗糖，质量百分比浓度6.0g/L琼脂，pH为5.8。

8.如权利要求1所述的以已结瓜的芋香冬瓜的芽为外植体的离体快繁技术，其特征在于，步骤5)中不定根长度达到5cm以上。