[发明专利]一种BCR-ABL融合基因定量检测的方法及试剂盒在审
| 申请号： | 201811630672.5 | 申请日： | 2018-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN109554474A | 公开（公告）日： | 2019-04-02 |
| 发明（设计）人： | 蒋析文;朱小亚;颜尔聪 | 申请（专利权）人： | 中山大学达安基因股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 上海助之鑫知识产权代理有限公司 31328 | 代理人： | 陈详 |
| 地址： | 510665 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 定量检测 融合基因 试剂盒 探针 特异性引物 检测系统 内参基因 上游引物 下游引物 荧光标记 检测 融合 | ||
1.一种定量检测BCR-ABL融合基因的引物对组，其特征在于，所述引物对组包括第一上游引物和第一下游引物，所述第一上游引物序列SEQ ID NO.:1所示；所述第一下游引物序列如SEQ ID NO.:3所示。
2.如权利要求1所述的引物对组，其特征在于，所述引物对组还包括第二上游引物，所述第二上游引物序列SEQ ID NO.:2所示。
3.如权利要求1所述的引物对组，其特征在于，所述引物对组还包括内控引物对，所述内控引物对包括：
SEQ ID NO：5所示的内控上游引物；和SEQ ID NO.:6所示的内控下游引物。
4.一种定量检测BCR-ABL融合基因的探针组，其特征在于，所述探针组包括SEQ IDNO.:4所示的探针序列。
5.如权利要求4所述的探针组，其特征在于，所述探针组还包括SEQ ID NO.:7所示的内控探针序列。
6.如权利要求4所述的探针组，其特征在于，SEQ ID NO：4核苷酸序列的5’端标记有FAM、3’端标记有BHQ1；和/或
SEQ ID NO：7核苷酸序列的5’端标记有VIC、3’端标记有BHQ1+ZIP。
7.一种定量检测BCR-ABL融合基因的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述的引物对组。
8.如权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括权利要求4所述的探针组。
9.如权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括RT-缓冲液，所述RT-缓冲液包括(NH4)2SO4、KCl、Tris-HCl、MgCl2、和DTT。
10.一种定量检测BCR-ABL融合基因的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：
(1)提供待检测样本，并提取待测样本基因组核酸；
(2)制备dPCR扩增反应体系，进行扩增反应：
其中，所述dPCR扩增反应体系包括步骤(1)提供的待检测样本；权利要求1所述的引物对组、和权利要求4所述的探针组。
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