[发明专利]从刺五加叶片中提取刺五加总皂苷的方法

说明书

本发明公开了一种从刺五加叶中提取刺五加总皂苷的方法，将超声提取后得到的粗提产物经过化学萃取与大孔树脂吸附联用的方式进行纯化，操作简便且提取效率高，同时萃取试剂与大孔树脂均能实现回收利用；在超声提取时的溶剂中加入有机试剂乙醇不仅提高了皂苷的得率，同时减少了水溶性杂质，降低了后期纯化的难度；在洗脱大孔树脂采用乙醇为洗脱剂，降低了试验毒性且提高了提取物的纯度，而且乙醇作为提取试剂价格低廉、安全无污染且在浓缩的过程中便可实现回收利用，有利于节省成本；采用低温低压的冷冻干燥法制备刺五加总皂苷，降低了制备过程中的损失。

技术领域

本发明属于皂苷类化合物提取技术领域，具体涉及一种从刺五加叶中提取刺五加总皂苷的方法。

背景技术

刺五加是五加科五加属的一种，其药性温和、无毒，具有补益强壮、益气健脾、扶正固本、镇静安神等作用，是一种免疫增强剂，能调节人体新陈代谢，增强人体对各种疾病的抵抗力，主要分布于我国东北以及华北地区，在中国医药学中做为药物广泛应用已有悠久的历史。而现代医学研究证明刺五加具有抗炎、抗肿瘤、抗辐射、抗衰老、免疫调节等功效。因具有广泛的生理活性而受到国内外学者的关注。

随着近年对刺五加的研究不断深入，发现其具有药理作用的主要活性成分为皂苷，且多为齐敦果烷型的三帖皂苷。如20世纪80年代初从刺五加叶中分离出的刺五加叶皂苷I、K、M和刺五加皂苷A、B、C、D、E、F，以及基于此基础由邵春杰等分离出的刺五加苷A₁、A₂、A₃、A₄、B、C₁、C₂、C₃、C₄、D₁、D₂、D₃和E，均为齐墩果烷型化合物。

传统的工艺是将刺五加饮片，用水提取或者75％乙醇提取的方法，或者在提取后用大孔树脂脱色，不仅提取分离效率低，而且有效部位或成分纯度不高，因此研究更加有效而高纯度的刺五加皂苷的提取分离方法具有重要的意义。

迄今为止刺五加总皂苷的提取的方法虽有很多，但均存在许多缺点，例如根据皂苷特性采用水或按比例混合有机溶剂水溶液作为提取液的浸提法的提取时间较长；以直接破碎细胞实现提取的超声提取法会导致杂质增多；通过微波场提取皂苷的微波提取法对设备的要求高等。

目前分离纯化刺五加总皂苷的主要方法有：大孔树脂吸附法、化学萃取法和超滤膜法。以上方法虽均能达到纯化目的但单一方法均有缺点与不足。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种从刺五加叶中提取刺五加总皂苷的方法，通过将超声提取后得到的粗提产物经过化学萃取与大孔树脂吸附联用的方式进行纯化，实现刺五加总皂苷的高效提取，萃取试剂与大孔树脂均能实现回收利用，降低成本的同时低碳环保。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种从刺五加叶中提取刺五加总皂苷的方法，按照以下步骤进行：

步骤1：将烘干后的刺五加叶片研磨成粉末与乙醇水溶液混合均匀，超声10min-20min后过滤得到第一次提取液，在剩余的残渣中加入与其等体积的乙醇水溶液重复上述步骤1-2次并将得到的提取液与第一次提取液混合；

其中，刺五加叶片粉末与乙醇水溶液的体积比为1:(20-30)；

步骤2：将步骤1得到的混合后的提取液浓缩至原体积的10％-30％后加入活性炭，于30℃-60℃水浴中加热10min-15min，过滤后得到滤液；

步骤3：向步骤2得到的滤液中加入与其同等体积的石油醚脱色数次至石油醚层澄清无色后，保留下层提取液，向下层提取液中加入与其同等体积的饱和正丁醇萃取2-3次并将萃取得到的上层的正丁醇溶液混合均匀，随后将混合后的正丁醇溶液旋转蒸发除去正丁醇后加入去离子水溶解，再冷冻干燥至粉末状；