[发明专利]SCR7在碱基编辑系统编辑受体基因组中的应用

权利要求书

1.扩大碱基编辑系统突变窗口范围的方法，所述方法包括如下步骤：使受体表达sgRNA、Cas9蛋白、胞嘧啶脱氨酶和尿嘧啶DNA糖化酶抑制剂，从而对所述受体基因组中的靶基因进行碱基编辑；所述使受体表达sgRNA、Cas9蛋白、胞嘧啶脱氨酶和尿嘧啶DNA糖化酶抑制剂通过将所述sgRNA的编码基因、所述Cas9蛋白的编码基因、所述胞嘧啶脱氨酶编码基因和所述尿嘧啶DNA糖化酶抑制剂的编码基因导入受体实现；

所述Cas9蛋白为SpCas9n蛋白；所述SpCas9n蛋白的氨基酸序列由序列表中序列1自5’末端起第3010至7278位所示的核苷酸序列翻译而成；

所述胞嘧啶脱氨酶为PmCDA1；所述PmCDA1的氨基酸序列由序列表中序列1自5’末端起第7570至8193位所示的核苷酸序列翻译而成；

所述尿嘧啶DNA糖化酶抑制剂的氨基酸序列由序列表中序列1自5’末端起第8215至8511位所示的核苷酸序列翻译而成；

所述受体为植物愈伤组织；

所述导入受体的过程中，用SCR7处理受体；所述SCR7的浓度为40-100μM；

所述突变窗口为C→T突变窗口。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述SCR7处理受体的方式为：将共培养22±2h的受体置于含SCR7的液相中，28±2℃悬浮培养20±2h。

3.SCR7在扩大SpCas9nPmCDA1UGI碱基编辑系统突变窗口范围中的应用；

所述SpCas9nPmCDA1UGI碱基编辑系统包含载体SpCas9nPmCDA1UGI；所述载体SpCas9nPmCDA1UGI的核苷酸序列如序列表中序列1所示；

所述突变窗口为C→T突变窗口。