[发明专利]一种重组人源脂肪细胞肽的创新制备工艺（简称：BMP-2干细胞）

权利要求书

1.一种重组人源脂肪细胞肽的创新制备工艺(简称：BMP-2干细胞)，其特征在于依次包括以下步骤：

(1)通过多重PCR快速合成基因同时构建表达载体；

(2)表达质粒导入宿主菌构建表达工程菌；

(3)发酵工程菌，30℃条件下诱导表达；

(4)对表达产物进行酶切释放BMP-2干细胞，经镍柱分离纯化获得BMP-2干细胞精品。

2.根据权利要求1所述的一种BMP-2干细胞的创新制备工艺(以下简称：权利要求1的创新制备工艺)，其特征在于：步骤(1)设计一系列引物，通过多轮PCR扩增，获得目的基因全长，并同时获得带有同源臂的载体(含目的基因)，经过PCR方式进行自连，构建含有缺口的环状DNA序列，通过转化大肠杆菌，在细胞内修复获得完整的表达载体BMP-2干细胞。

3.根据权利要求1的创新制备工艺，其特征在于：表达载体中BMP-2干细胞基因置于Trc启动子之下。

4.根据权利要求1的创新制备工艺，其特征在于：表达载体中BMP-2干细胞基因C端连接有促进折叠的分子伴侣PDI基因。

5.根据权利要求1的创新制备工艺，其特征在于：表达载体中BMP-2干细胞基因N端连接有用于分离的6×HIS标签。

6.根据权利要求1的创新制备工艺，其特征在于：构建的最优表达载体导入E.coliTransetta(DE3)，构建表达工程菌。

7.根据权利要求1的创新制备工艺，其特征在于：在30℃条件下诱导，大部分产品以可溶形式表达，经低温酶切释放BMP-2干细胞，再经镍柱分离纯化获得精品。

8.根据权利要求1的创新制备工艺，其特征在于：一种BMP-2干细胞在临床病毒防治、抵抗细胞衰老、促进伤口愈合及在表皮、真皮、粘膜中的修复作用和在医疗、美容、保健等领域拥有广阔的应用前景。