[发明专利]一种新的甘氨酸含量的检测方法在审

专利信息
申请号: 201811635412.7 申请日: 2018-12-29
公开(公告)号: CN109633011A 公开(公告)日: 2019-04-16
发明(设计)人: 娄良;楼秋霞;郭然;吴黎雄;张和平 申请(专利权)人: 中山百灵生物技术有限公司
主分类号: G01N30/02 分类号: G01N30/02;G01N30/06
代理公司: 中山市兴华粤专利代理有限公司 44345 代理人: 吴剑锋
地址: 528400 广东*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 甘氨酸 对照品溶液 对照品 稀释剂 供试品溶液 检测 溶解 工业化大生产 计算供试品 检测器检测 液相色谱仪 中间反应 大极性 对数法 灵敏度 色谱图 小分子 监控 记录
【权利要求书】:

1.一种新的甘氨酸含量的检测方法,其特征在于包括以下步骤:

A、取甘氨酸对照品用稀释剂溶解成浓度为0.2mg/ml、1.0mg/ml的对照品溶液,取甘氨酸样品用稀释剂溶解为浓度为0.1~1.0mg/ml的对照品供试品溶液;

B、分别取浓度为0.2mg/ml的对照品溶液、浓度为1.0mg/ml的对照品溶液和度为0.1~1.0mg/ml的对照品供试品溶液,各20ul注入液相色谱仪中,采用ELSD检测器检测,记录色谱图中甘氨酸的峰面积,按照外标两点对数法,计算供试品中甘氨酸的含量。

2.根据权利要求1所述的一种新的甘氨酸含量的检测方法,其特征在于步骤B的液相色谱仪中流动相A为pH值4.0,浓度为0.02mol/L的甲酸铵水溶液,流动相B为乙腈。

3.根据权利要求2所述的一种新的甘氨酸含量的检测方法,其特征在于步骤B中以流动相A与流动相B进行梯度洗脱,所述梯度为:

4.根据权利要求2所述的一种新的甘氨酸含量的检测方法,其特征在于步骤B中液相色谱仪中采用HILIC亲水色谱柱,流速:0.6-1ml/min,柱温:30-50℃,漂移管温度:40-60℃。

5.根据权利要求4所述的一种新的甘氨酸含量的检测方法,其特征在于所述流速:0.8ml/min,柱温:40℃,漂移管温度:50℃。

6.根据权利要求2所述的一种新的甘氨酸含量的检测方法,其特征在于所述的稀释剂为甲酸铵水溶液与乙腈按体积比1-5:5-9的混合物,其中甲酸铵水溶液pH值4.0,浓度为0.02mol/L。

7.根据权利要求2或6所述的一种新的甘氨酸含量的检测方法,其特征在于采用甲酸调pH值。

8.根据权利要求1或所述的一种新的甘氨酸含量的检测方法,其特征在于还包括有系统适应性测定,其中系统适应性有关物质为丙氨酸;

分别取约25mg甘氨酸对照品、丙氨酸对照品用稀释剂溶解,摇匀并定容到50ml,作为系统适用性溶液;

取系统适用性溶液20ul注入液相色谱仪,记录色谱图各峰的分离度和理论塔板数,分离度的大小要不小于1.5,理论踏板数不小于2000。

9.根据权利要求1或所述的一种新的甘氨酸含量的检测方法,其特征在于步骤A中取甘氨酸样品用稀释剂溶解为浓度为0.5mg/ml的对照品供试品溶液。

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