[发明专利]一种抗PRLR的单克隆抗体及其制备方法和应用

说明书

本发明属于生物医药领域，更具体地，公开了一种抗PRLR的单克隆抗体及其制备方法和应用。本发明的抗PRLR单克隆抗体具有良好的生物活性，能够更有效结合PRLR蛋白，在蛋白水平较好地封闭PRLR蛋白与其受体相结合，本发明所得单克隆抗体对T47D细胞具有显著的ADCC作用，能通过NK细胞，有效地杀伤肿瘤细胞，能够单独或与其它抗肿瘤药物联合应用在肿瘤免疫治疗以及诊断和筛查中，还具有制备治疗肿瘤、抗自身免疫性疾病等药物的良好前景。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种抗PRLR的单克隆抗体及其制备方法和应用。

背景技术

催乳素（Prolactin，PRL）又叫促乳素或催乳激素，是一种由脑垂体分泌的蛋白质激素，主要作用为促进乳腺发育生长，刺激并维持乳汁分泌。但是近来研究发现，在女性外周血中，过高的催乳素与乳腺癌的发生高度相关，尤其是对于雌激素受体阳性的病人。PRL通过与位于靶细胞质膜上的一对单跨膜（TM）结构域1型细胞因子受体相互作用激活靶细胞。PRL的同种型受体是通过从单个基因转录的RNA的差异剪接（Kelly PA et al, 1991，Endocr Rev 12:235–251）或通过翻译后修饰得到的。在鉴定和表征人PRL（hPRL）信号通路中涉及的分子方面取得了实质性进展（Clevenger CV et al., 2001.Lupus 10:706–718）；这些途径包括Janus激酶（JAK）/信号转导和转录激活因子（STAT）系统等（Watson CJ etal., 1996. Rev Reprod 1:1–5）。催乳素能促进乳腺上皮细胞的增殖和分化，在乳腺癌发生过程中起到非常重要的作用。另外，催乳素水平的升高，刺激了乳腺癌组织中与碳水化合物合成代谢有关的酶，加速乳腺癌组织中脂质和碳水化合物的代谢，因此在很大程度上加速了乳腺癌的发生。

催乳素通过结合其受体（Prolactin Receptor，PRLR）来发挥其生物学功能。PRLR是一种与乳腺癌高度相关的I型细胞因子受体。人催乳素受体（hPRL）是由三个主要结构域组成的I型细胞因子受体，三种主要结构域包括：EC，TM和IC。 hPRL受体存在通过差异RNA剪接或翻译后切割产生的几种同型受体（Tan D et al., 2008. Biochemistry 47:479–489）。 在EC或IC结构域中能够观察到这些结构变异，其中TM结构域在所有报道的同型受体中是相同的。 IC结构域的差异剪接产生了长型受体（Boutin JM et al., 1989. MolEndocrinol 3:1455–1461），中间型受体（Kline JB et al., 1999. J Biol Chem 274:35461–35468）和两种形式的短型hPRL受体（Hu ZZ et al., 2001. J Biol Chem 276:41086–41094）。

 虽然PRLR自身缺少细胞内的激酶活性结构域，但当催乳素与PRLR结合时，会诱发PRLR形成二聚体，进而使其细胞内部结构发生改变，活化细胞内部的其它因子从而发挥细胞学功能。主要的信号通路是Jak2/Stat5，除此之外，还有Jak1/Stat3，PI3K/Akt，Raf/MEK/ERK。另外，除了催乳素，生长激素（growth hormone）和胎盘催乳素（placental lactogen）也是PRLR的配体。PRLR还与其它生长因子受体和激素受体信号通路存在交联关系，例如胰岛素生长因子受体1（IGF1R），表皮生长因子受体（EGFR），表皮生长因子受体2（HER2），雌激素受体α（ERα）等。

已有研究表明，通过作用PRLR，阻断其信号通路，在体外可以抑制乳腺癌细胞的增殖。动物体内实验也证明，抗PRLR抗体可以抑制肿瘤细胞在体内的生长，从而预示抗PRLR抗体可能具有治疗与催乳素相关的癌症的作用前景。因此研发抗PRLR单克隆抗体，用于癌症的治疗，使其具有更高的选择性和亲和力、更低的毒副作用以及较为低廉的用药成本，从而为肿瘤患者提供更多的单克隆抗体类药物选择，已经成为亟待解决的问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供了一种新的抗PRLR单克隆抗体，从而完成了本发明。