[发明专利]四种类型大白菜杂交种纯度鉴定核心引物及杂交种纯度InDel分子标记鉴定试剂盒

说明书

本公开涉及四种类型大白菜杂交种纯度鉴定核心引物及杂交种纯度InDel分子标记鉴定试剂盒，通过广泛筛选相关InDel分子标记，挖掘出一批在分别在不同类型大白菜杂交种中杂合度较高的引物组合，这些引物组合用于相应类型大白菜双亲鉴定，可以构建双亲的特征DNA指纹，用其中双亲间有多态性的引物或引物组合，又可以鉴定杂交种纯度。将这些引物组合构成一个试剂盒，大大降低了企业或育种单位自行开发标记的成本，具有广泛的应用前景。

技术领域

本公开属于农业蔬菜品种鉴定领域，具体涉及四种类型大白菜杂交种纯度鉴定核心引物及杂交种纯度InDel分子标记鉴定试剂盒。

背景技术

这里的陈述仅提供与本公开有关的背景信息，而不必然构成现有技术。

大白菜栽培面积居我国各类蔬菜之首，用种量巨大。目前在大白菜生产上主要使用杂交种，杂交种的种子纯度是种子质量的重要指标之一，对大白菜的商品性和产量有重要的影响。山东是大白菜杂交种主要供种地区，每年向全国各地供应的大白菜杂交种达10⁵千克，占全国总用种量的一半以上，产值超1亿元，因此大白菜杂交种的生产与经营对我省种子产业的发展具有重要影响。传统的大白菜杂交种纯度鉴定一般是采用田间形态学鉴定法，由于山东省大白菜制种多在春季进行，夏季收获的种子往往需要在秋季播种鉴定，鉴定时间需要一个完整的营养生长季节，持续的时间较长，鉴定出结果时已经错过了一个销售旺季，导致当年收获的杂交种只能次年销售，增加了企业的种子贮藏成本。另外田间形态学鉴定也容易受各种环境因素的影响，因此需要开发一种时间提早、操作简单、快速准确、且与常规鉴定结果相一致的大白菜杂交种纯度鉴定方法。

采用分子标记法鉴定种子纯度不受环境限制、快速准确，已经发展成为一种比较成熟的技术，如SRAP标记(严慧玲,闫树成,杨慧民,汲江科,蒋艳霞.利用SRAP分子标记技术鉴定大白菜种子纯度[J].热带农业科学,2011,31(06):50-52+60)、SSR标记(管志坤,罗双霞,李艳霞,陈雪平,王彦华,顾爱侠,申书兴.利用SSR标记鉴定油绿3号大白菜品种纯度[J].种子,2011,30(09):34-35+39.杨晓云,田术美,张清霞,张淑霞,司朝光,王媛,王德森.青研系列大白菜杂交种及亲本指纹图谱构建和杂种纯度鉴定[J].分子植物育种,2013,11(01):107-112；马效鹏,刘梦龙,张鲁刚.大白菜新品种“秋白80”纯度的SSR鉴定[J].西北农业学报,2013,22(10):131-134.)、EST-SSR标记(赵新,王永,兰青阔,贺长征,陈锐,李欧静,刘娜,朱珠,郭永泽.基于复合EST-SSR标记的大白菜种子纯度鉴定及SNP位点获取[J].中国蔬菜,2013(14):31-38.)等已经分别被用于不同品种大白菜杂交种的纯度鉴定。在上述关于分子标记鉴定大白菜杂交种纯度的研究中，研究者们仅筛选到1-4对仅适宜特定杂交种纯度鉴定的引物或引物组合，这些引物不适宜其它杂交种纯度鉴定，也不能用于鉴定种子的真实性。相比较而言杨晓云等(2011)采用的SSR引物组合的形式不仅可以鉴定更多的杂交种或亲本材料，也能用于杂交种真实性的鉴定。但至迄今为止还没有普遍适用的引物组合可以用于大白菜杂交种纯度鉴定。

发明内容