[发明专利]一种德谷胰岛素前体的纯化方法在审
| 申请号： | 201811638169.4 | 申请日： | 2018-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN109851667A | 公开（公告）日： | 2019-06-07 |
| 发明（设计）人： | 梅丽;张媛;文良柱;李秀 | 申请（专利权）人： | 江苏万邦医药科技有限公司;江苏万邦生化医药集团有限责任公司 |
| 主分类号： | C07K14/62 | 分类号： | C07K14/62;C07K1/18 |
| 代理公司： | 南京众联专利代理有限公司 32206 | 代理人： | 卢倩 |
| 地址： | 221004 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 胰岛素前体 阳离子交换层析 酶切 简化生产工艺 离子交换层析 大肠杆菌 变性复性 工艺步骤 化工领域 药物合成 一步纯化 胰岛素原 包涵体 胰岛素 变性 复性 制备 捕获 发酵 | ||
1.一种德谷胰岛素前体纯化方法，其特征在于，采用阳离子交换层析，通过洗脱液洗脱得到纯品；所述洗脱液由洗脱缓冲液A与洗脱缓冲液B按照1:3的比例混合形成；
所述缓冲液A为磷酸缓冲液、柠檬酸缓冲液、乳酸缓冲液中任意一种，所述缓冲液A中还包括：有机相；所述有机相为甲醇、乙腈、乙醇、正丙醇中任意一种；
所述缓冲液B为磷酸缓冲液、柠檬酸缓冲液、乳酸缓冲液中任意一种，所述缓冲液B中还包括：有机相和无机盐；所述有机相为甲醇、乙腈、乙醇、正丙醇中任意一种；所述无机盐为的氯化铵、硫酸铵、氯化钠中任意一种。
2.如权利要求1所述的德谷胰岛素前体纯化方法，其特征在于，所述缓冲液A和缓冲液B的pH为2.0-4.0。
3.如权利要求1所述的德谷胰岛素前体纯化方法，其特征在于，所述缓冲液A和缓冲液B的pH为3.5。
4.如权利要求1所述的德谷胰岛素前体纯化方法，其特征在于，所述缓冲液A为质量分数为10％的正丙醇和20mmol/L乳酸形成的缓冲液；所述缓冲液B为质量分数为10％的正丙醇和20mmol/L乳酸和0.5mol/L氯化钠形成的缓冲液。
5.如权利要求1所述的德谷胰岛素前体纯化方法，其特征在于，所述离子交换层析填料为阳离子填料，所述阳离子填料为Capto S、UniMSP30xS、NanoSP30L中任意一种。
6.如权利要求1所述的德谷胰岛素前体纯化方法，其特征在于，所述离子交换层析填料为UniMSP30xS。
7.如权利要求1所述的德谷胰岛素前体纯化方法，其特征在于，所述洗脱液流速为：线流速50-150cm/h。
8.如权利要求1所述的德谷胰岛素前体纯化方法，其特征在于，所述洗脱液流速为：线流速50-100cm/h。
9.如权利要求1所述的德谷胰岛素前体纯化方法，其特征在于，所述离子交换层析的载量为5-30mg/ml。
10.如权利要求1所述的德谷胰岛素前体纯化方法，其特征在于，所述离子交换层析的载量为15-20mg/ml。
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