[发明专利]一种干细胞无血清培养基在审

专利信息
申请号: 201811639110.7 申请日: 2018-12-29
公开(公告)号: CN109593717A 公开(公告)日: 2019-04-09
发明(设计)人: 吴家波;周海军 申请(专利权)人: 广州和能生物科技有限公司
主分类号: C12N5/0789 分类号: C12N5/0789
代理公司: 深圳市合道英联专利事务所(普通合伙) 44309 代理人: 廉红果
地址: 510000 广东省广州市*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 细胞因子 基础培养基 造血干细胞 干细胞 抗体 外扩 造血 无血清培养基 细胞增殖过程 无血清培养 脂类复合物 谷氨酰胺 生长因子 体外增殖 增殖效率 转铁蛋白 存活率 微量元素 动物源 高活性 体积比 无血清 胰岛素 抗原 血清 添加剂 死亡率 激素 细胞
【权利要求书】:

1.一种干细胞无血清培养基,包括基础培养基、添加成分以及细胞因子组合,其特征在于:以基础培养基的体积作为基准,所述添加成分组成及其含量分别为转铁蛋白,体积比为5%-10%、胰岛素,5-15mg/L、L-谷氨酰胺,2-4mM、生长因子,5-15ng/mL、BMP-5抗体,0.05-0.25ng/mL、脂类复合物,2-4mM以及微量元素,1-5mg/L。

2.如权利要求1所述的一种干细胞无血清培养基,其特征在于:所述基础培养基采用DMEM基础培养基。

3.如权利要求1或2所述的一种干细胞无血清培养基,其特征在于:以DMEM基础培养基的体积作为基准,所述细胞因子组合组成以及含量分别为:干细胞生长因子(SCF),10-20ng/mL、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF),5-15ng/mL、白细胞介素3(IL-3),1-5ng/mL以及白细胞介素6(IL-6)1-15ng/mL。

4.如权利要求2所述的一种干细胞无血清培养基,其特征在于:所述DMEM基础培养基为高糖型DMEM基础培养基,葡萄糖浓度为3000mg/L-4500mg/L。

5.如权利要求1所述的一种干细胞无血清培养基,其特征在于:所述干细胞无血清培养基适用于脐血造血干细胞以及骨髓造血干细胞等造血干细胞的体外扩增培养。

6.如权利要求1或2所述的一种干细胞无血清培养基,其特征在于:所述DMEM基础培养基和添加剂按照特定体积比或含量混合制得培养液。

7.如权利要求3或6或所述的一种干细胞无血清培养基,其特征在于:所述细胞组合因子添加时间为造血干细胞接种于培养液后并在造血干细胞体外扩增中逐步添加。

8.如权利要求7或所述的一种干细胞无血清培养基,其特征在于:所述造血干细胞体外扩增周期为14d。

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