[发明专利]一种珊瑚脂质的提取方法

说明书

本发明公开了一种珊瑚脂质的提取方法。该方法的步骤为：1)将珊瑚和水混合，研磨成匀浆；2)往匀浆中加入氯仿‑甲醇混合液进行萃取，过滤，收集滤液；3)往滤液中加入KCl溶液，然后进行分液操作保留有机相；4)往有机相中加入甲醇‑水混合液进行洗涤、分液，保留有机相；5)将4)得到的有机相在氮气真空环境中蒸发至干，然后用氯仿复溶后再次蒸干，得到脂质。本发明的珊瑚脂质的提取方法具有操作简便，耗时短，提取效率高的优点，对珊瑚的研究和保护具有重要意义。

技术领域

本发明涉及珊瑚生理生态学研究技术领域，具体涉及一种珊瑚脂质的提取方法。

背景技术

珊瑚礁生态系统是地球上生产力和多样性最高生态系统之一。但是近年来，随着人类对海洋的开发力度逐渐增加和气候变化，珊瑚礁生态系统出现显著的退化。为了研究人类活动和环境变化对珊瑚礁生态系统的具体影响，我们需要从各个不同的方面来认识和理解珊瑚的生理学响应机制。其中能量代谢的变化就是很重要的一部分，而珊瑚脂质作为能量储备的重要物质，脂质含量作为珊瑚生理健康状态的重要指示参数，显得格外重要。所以，提取珊瑚组织中的脂质从而对其变化进行研究则尤为重要。本发明提供了一种简便、高效的方法提取珊瑚中的脂质，优化了操作流程与试剂用量，阶段性地缩短了实验操作周期，对珊瑚的生理学研究和保护具有重要意义。

孙甜甜等人(南极磷虾脂质提取方法的比较，食品工业科技，2012,33(16):115-117)利用氯仿-甲醇、正己烷和95％乙醇三种不同溶剂及超临界CO₂技术提取南极磷虾脂质，对比发现氯仿-甲醇的提取率最高。脂质提取的Floch法(即应用氯仿-甲醇来提取生物脂质方法，Folch J,Lees,M and Stanley GHS.A simple method for the isolation andpurification of total lipides from animal tissues.J.Biol.Chem.1967，226:497-509)得到较广泛的应用，但该方法的提出针对的是普遍的生物组织，对于某些生物脂质的提取效果不好。本发明的对比例1实验结果中证明了该说法。本发明在此方法上做出改进，提出一种专门针对珊瑚脂质的提取方法。

郭少华等人(风信子鹿角珊瑚繁殖前后脂质与脂肪酸的变化，热带海洋学报，2014,33(1):74-80)中采用氯仿-甲醇混合液提取法提取珊瑚中的脂质，但该方法只是沿用Rodrigues(Physiology and biogeochemistry of bleached and recovering coralsfrom Hawaii.University of Pennsylvania,P.h.D thesis,2007,1-265.)的方法，没有通过实验寻找到最适合珊瑚的试剂用量，提取脂质时采用的是珊瑚湿样直接提取，本发明的对比例2实验结果显示，珊瑚湿样的脂质提取率较低，并且由于没有洗涤步骤，提取出的脂质纯度也不高。

发明内容

本发明的目的是提供一种海洋生物珊瑚脂质的提取方法，该方法具有操作简便、阶段性操作时间短、提取效率高的优点，对珊瑚的研究和保护具有重要意义。

本发明通过以下技术方案来实现：

一种珊瑚脂质的提取方法，包括以下步骤：

(1)将珊瑚和水混合，研磨成匀浆；

(2)往步骤(1)得到的匀浆中加入氯仿-甲醇混合液进行萃取，过滤，收集滤液；

(3)往步骤(2)得到的滤液中加入KCl溶液，然后进行分液操作保留有机相；

(4)往步骤(3)得到的有机相中加入甲醇-水混合液进行洗涤、分液，保留有机相；

(5)将步骤(4)得到的有机相在氮气真空环境中蒸发至干，然后用氯仿复溶后再次蒸干，得到脂质。