[发明专利]一种促进哈尔滨不动细菌低温下快速生长和活性提高的方法

说明书

本发明公开了一种促进哈尔滨不动细菌低温下快速生长和活性提高的方法，涉及细菌低温生长和活化技术领域，具体为：1)用异养硝化培养基培养哈尔滨不动细菌，得到培养液，从培养液中分离菌体，加入无菌水制成菌悬液；2)在异养硝化培养基中加入微量元素，制成微量元素异养硝化培养基；3)将制备的菌悬液接种如微量元素异养硝化培养基；4)进行扩大培养，得到低温下快速生长并且活性提高的哈尔滨不动细菌。本发明提供的方法解决了哈尔滨不动细菌低温下生长缓慢，氨氮去除效率低的问题。

技术领域

本发明涉及细菌低温生长和活化技术领域，具体涉及一种促进哈尔滨不动细菌低温下快速生长和活性提高的方法。

背景技术

哈尔滨不动细菌HITLi7^T筛选自冬季松花江水，能在1～2℃下生长，在2℃条件下平均氨氮去除速率为0.092±0.006mg NH₄⁺-N/L/h，且在氨氮代谢过程中，亚硝酸盐和羟胺均未出现积累现象。在前期研究工作中，对新菌种HITLi7^T的氨氮去除效率及影响因素进行了系统研究，结果表明，当温度为8℃，pH6.0，C/N比为10时，HITLi7^T对氨氮的去除速率最高，为0.18mg L^-1·h^-1。为了能使新菌种HITLi7^T应用于净水工艺，构建了生物增强活性炭工艺，发现在2℃和8℃条件下，基于新菌种HITLi7^T的BEAC工艺可分别去除0.25±0.05mg L^-1和0.44±0.05mg L^-1的氨氮，是普通活性炭的2.8～4.0倍。

由于菌株HITLi7^T在低温饮用水系统中具有较好的降解氨氮的潜力，菌株HITLi7^T已被用于去除中国北方地下水和地表水中的氨氮。在处理松花江水时，我们发现冬季氨氮去除率仅为21％，并且难以进一步改善。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供一种促进哈尔滨不动细菌低温下快速生长和活性提高的方法，技术方案为：

1)用异养硝化培养基培养哈尔滨不动细菌，得到培养液，从培养液中分离菌体，加入无菌水制成菌悬液；

2)在异养硝化培养基中加入微量元素B、Fe、Mn，制成微量元素异养硝化培养基；

3)将制备的菌悬液接种如微量元素异养硝化培养基；

4)进行扩大培养，得到低温下快速生长并且活性提高的哈尔滨不动细菌。

上述步骤，按照步骤1)、2)、3)、4)的顺序进行或按照步骤2)、1)、3)、4)的顺序进行。

所述哈尔滨不动细菌为哈尔滨不动细菌HITLi7^T，从中国普通微生物菌种保藏管理中心购买获得，保藏编号为CGMCC 1.12528^T。

步骤1)所述异养硝化培养基配方为：0.382g L^-1NH₄Cl,2g L^-1CH₃COONa,0.2g L^-1K₂HPO₄,0.05g L^-1MgSO₄,0.12g L^-1NaCl。

步骤1)所述培养，环境为4℃，100rpm振荡培养。

所述培养液，OD值达到0.8以上。

步骤1)所述分离菌体，具体为：取培养液，4℃、8000r min^-1转速下离心5min，取沉淀为菌体。

所述菌体，加入无菌水前，用无菌水洗涤2次。